[发明专利]一种以叶酸和WGA为靶向因子的石墨烯药物载体的制备方法

摘要

本发明涉及一种由氧化石墨烯、6‑羧甲基‑γ‑环糊精、叶酸和麦胚凝集素(WGA)为主要原料制备的具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体及其制备方法。本发明首先以氧化石墨烯和对甲苯磺酰氯为原料，使氧化石墨烯羟基活化，接枝L‑赖氨酸，用水合肼将接枝有赖氨酸的氧化石墨烯还原；然后将其在1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)的共同催化下，与6‑羧甲基‑γ‑环糊精和叶酸反应，生成同时接枝有γ‑CD和叶酸的纳米石墨烯，再将麦胚凝集素与γ‑CD组装，制备具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体。

主权项

1.一种以氧化石墨烯、6‑羧甲基‑γ‑环糊精、叶酸和麦胚凝集素(WGA)为主要原料制备的具有叶酸和麦胚凝集素双重靶向因子的石墨烯纳米药物载体及其制备方法，包括下列步骤：(1)酰氯化氧化石墨烯将10.00g氧化石墨烯(纯度99％，厚度：≤5nm，尺寸：2‑8um)分散于100mL氯仿中，升温至55℃，搅拌下分别缓慢滴入5.50g二氯亚砜和2.00gN‑甲基吡咯烷酮，升高温度至沸腾，回流反应3h，降温至25℃，3000转/分钟，离心10分钟，倾去上清液，刮出沉淀，冷冻干燥，得褐色固体粉末，保存，备用；(2)L‑赖氨酸接枝氧化石墨烯将5.00gL‑赖氨酸加入到50mL蒸馏水中，25℃下搅拌溶解后，降温至10℃，缓慢加入步骤(1)的产物，搅拌反应5h，再升温至30℃，继续搅拌反应2h，冷却至25℃，过滤，无水乙醇洗涤3次，冷冻干燥，得白色固体粉末，备用；(3)L‑赖氨酸接枝氧化石墨烯的还原于25℃温度下，取100mL蒸馏水，通入N210分钟，加入20.00gL‑抗坏血酸，在N2流下搅拌溶解后，加入上述步骤(2)的样品5.00g，保持温度在25℃，搅拌反应24h，过滤，蒸馏水洗涤6次，真空干燥，得黑色固体粉末，备用；(4)6‑羧甲基‑γ‑环糊精和叶酸的接枝将2.50g 6‑羧基‑γ‑环糊精和0.50g叶酸加入50mL蒸馏水中，室温搅拌溶解后，再加入上述步骤(3)的样品，在N2流下搅拌分散，降温至0℃，缓慢加入3.00g30％的EDC水溶液和2.00g10％的NHS水溶液，于0℃反应2h，再于25℃下反应48h，过滤，蒸馏水洗涤3次，真空干燥，得黑色固体粉末，备用；(5)WGA的组装将上述步骤(4)的产物分散于500mL注射用水中，NaCl调节溶液的冰点为‑0.52℃，然后加入0.2gWGA，50Hz超声震荡1h，得黑色悬浮液，密封保存。