[发明专利]耐热性提高的甘露聚糖酶PMan5A突变体及其基因和应用有效
| 申请号： | 201810448554.6 | 申请日： | 2018-05-11 |
| 公开（公告）号： | CN108559739B | 公开（公告）日： | 2021-03-26 |
| 发明（设计）人： | 罗会颖;姚斌;刘伟娜;顾原;涂涛;王苑;王亚茹;黄火清;柏映国;苏小运;孟昆 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/81;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种耐热性能提高的甘露聚糖酶突变体及其基因和应用，其以来源于青霉菌Penicillium sp.WN1的GH5家族甘露聚糖酶PMan5A为母本，采用分子生物学手段将母本中第93、94、356和389位点的组氨酸(H)、苯丙氨酸(F)、亮氨酸(L)和丙氨酸(A)突变成酪氨酸(Y)、酪氨酸(Y)、组氨酸(H)和脯氨酸(P)。结果显示，单点突变体H93Y、L356H和A389P的耐热特性较野生酶PMan5A均有大幅度提高，并且组合突变体H93Y/F94Y、H93Y/L356H、H93Y/A389P、L356H/A389P、H93Y/F94Y/L356H、H93Y/L356H/A389P、H93Y/F94Y/L356H/A389P的耐热性表现出单点突变的叠加效应，说明PMan5A的93、94、356和389位点在GH5家族甘露聚糖酶的耐热特性中扮演了重要角色，这可能对其它GH5家族(α/β)8桶状酶的耐热性能机制的研究具有重要的指导意义。 | ||
| 搜索关键词： | 耐热性 提高 甘露 聚糖 pman5a 突变体 及其 基因 应用 | ||
【主权项】：
1.耐热性提高的甘露聚糖酶PMan5A突变体，其特征在于，所述甘露聚糖酶PMan5A突变体通过将成熟的甘露聚糖酶PMan5A进行H93Y、F94Y、L356H和/或A389P点突变获得，所述成熟的甘露聚糖酶PMan5A的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
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