[发明专利]一种促进皮肤创伤愈合的多因子载体的制备及应用在审
申请号: | 201810448588.5 | 申请日: | 2018-05-11 |
公开(公告)号: | CN108611321A | 公开(公告)日: | 2018-10-02 |
发明(设计)人: | 沈洁;沈艳 | 申请(专利权)人: | 深圳市旷逸生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;A61K35/28;A61P17/02 |
代理公司: | 北京华际知识产权代理有限公司 11676 | 代理人: | 杨觅 |
地址: | 518000 广东省深圳市前海深港合作区前*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了皮肤创伤修复技术领域的一种促进皮肤创伤愈合的多因子载体的制备及应用,该制备方法的具体步骤如下:S1:取25~30岁的成年人腹部皮下脂肪组织作为人脂肪干细胞标本;S2:将分离好的脂肪组织标本移入安培瓶,用剪刀剪碎10~15min后呈乳糜状;S3:在无菌条件下从猪髂骨处抽取骨髓;S4:将步骤S2中的标本与步骤S3中的充质干细胞混合;S5:随后将塔斯品碱混入步骤S4中的混合物中;S6:过滤后的液体加入适量的干细胞培养液,于30~40°下培养3~7d,制得成品,本发明可以优化成纤维细胞的生物学性能,促进了成纤维细胞的迁移以及增殖能力,调控胶原合成,有助于缩短皮肤创伤愈合的时间,并减少瘢痕的形成,提高创伤愈合质量。 | ||
搜索关键词: | 皮肤创伤 制备 愈合 成纤维细胞 因子载体 标本 腹部皮下脂肪组织 干细胞培养液 皮肤创伤修复 充质干细胞 脂肪干细胞 创伤愈合 胶原合成 塔斯品碱 无菌条件 增殖能力 脂肪组织 混合物 安培瓶 混入 剪碎 移入 瘢痕 髂骨 剪刀 生物学 骨髓 过滤 应用 抽取 迁移 调控 优化 | ||
【主权项】:
1.一种促进皮肤创伤愈合的多因子载体的制备,其特征在于:该制备方法的具体步骤如下:S1:取25~30岁的成年人腹部皮下脂肪组织作为人脂肪干细胞标本,用配置好的标本液反复冲洗标本3~5次;S2:用镊子分离脂肪标本表面的筋膜和血管,将分离好的脂肪组织标本移入安培瓶,用剪刀剪碎10~15min后呈乳糜状,放置备用;S3:在无菌条件下从猪髂骨处抽取骨髓,经过密度梯度离心收集界面层的单个核细胞,随后用标本液冲洗2~3次,离心收集细胞,重悬于培养液中进行培养,隔日换液,弃去未贴壁的细胞,待贴壁细胞继续培养到80~90%融合时,用胰蛋白酶消化,传代培养;S4:将步骤S2中的标本与步骤S3中的充质干细胞混合,随后用0.1~0.3%Ι型胶原酶在30~40°水浴下消化40~50min,期间不断摇匀加速消化;S5:随后将塔斯品碱混入步骤S4中的混合物中,在离心管中离心,吸干净溶液上层脂肪细胞层和筋膜层,下层液体吹打混匀后过细胞筛;S6:过滤后的液体加入适量的干细胞培养液,吹打混匀后,接种至培养瓶中,于30~40°下培养3~7d,制得成品。
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