[发明专利]一种分离制备茶树紫芽花色苷高纯品的方法

摘要

一种分离制备茶树紫芽花色苷高纯品的方法，是将茶树紫芽经酸性乙醇溶液提取后，先萃取脱脂和强酸型阳离子交换树脂分离去杂，再通过高速逆流色谱分离得到花色苷精制品，最后用制备型高效液相色谱纯化得到5种花色苷高纯品。本方法以富含花色苷的紫芽茶树品种(紫娟、红芽佛手、安73和自选9803)的茶鲜叶作为原料，创新应用多级分离、纯化工艺技术，同时制得单一花色苷纯度达到90％以上的5种茶树紫芽花色苷高纯品，其中飞燕草素‑3‑O‑(6‑(E)对香豆酸)吡喃半乳糖苷纯度超过98％，达到单体质量要求。整个生产工艺简单，生产成本较低，可操作性强，不仅为其药理药效的研究和功能性终端产品的开发提供优质原料，而且真正实现了茶树紫芽资源的高值化利用。

主权项

1.一种分离制备茶树紫芽花色苷高纯品的方法，其特征在于：该方法步骤如下：a、茶样前处理工艺：以紫芽茶树一芽二叶为原料，将茶叶真空冷冻干燥，磨成粉，以含冰醋酸的乙醇溶液在室温下静置避光浸提，得提取液；以正己烷、乙酸乙酯及水按体积比为1～1.5:1～1.5:1.5～2混合的混合溶剂对提取液进行萃取脱脂；将脱脂后的提取液上钠型732阳离子交换树脂柱，先采用70‑90％体积浓度的乙醇洗脱以去除多酚类杂质，再采用4％HCl‑乙醇溶液进行梯度洗脱，按乙醇浓度梯度分别收集洗脱液，合并洗脱液，浓缩回收乙醇，过D101大孔吸附树脂脱除盐酸，减压浓缩，真空冷冻干燥，得花色苷粗品粉末；b、高速逆流色谱分离制备花色苷精制品：将上述花色苷粗品粉末用纯水稀释至10％质量浓度，注入高速逆流色谱仪中进行分离，在温度20～30℃、检测波长280nm的条件下，将乙酸乙酯‑正丁醇‑乙腈‑0.1％三氟乙酸水按体积比为0.5～1.5:3～4:1～2:5～7混合作为两相溶剂系统，分步接收色谱流出液进行检测,合并相同的化合物流出夜,减压浓缩，真空冷冻干燥，得到花色苷精制品；c、制备型高效液相色谱纯化花色苷高纯品：将上述花色苷精制品用纯水稀释至10％质量浓度，注入制备型高效液相色谱仪中进行纯化，根据流出液颜色、出峰峰形及出峰时间分别收集到5种花色苷组分流出液，将该些花色苷组分流出液分别进行高效液相色谱检测，当花色苷组分纯度≥90％时，真空冷冻干燥，即得花色苷高纯品；当流出液中的花色苷组分纯度低于90％时，再次以制备型高效液相色谱仪进行纯化，将组分流出液分别真空冷冻干燥，即得到纯度≥90％的花色苷高纯品。