[发明专利]一种非基因修饰光操控双向调节人脐带间充质干细胞增殖的方法有效

专利信息
申请号: 201810455899.4 申请日: 2018-05-14
公开(公告)号: CN108624554B 公开(公告)日: 2021-09-14
发明(设计)人: 李曦;杨坤;刘巧;刘京郊 申请(专利权)人: 山东大学
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775;C12N13/00
代理公司: 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 代理人: 陈桂玲
地址: 250012 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明涉及一种非基因修饰光操控双向调节人脐带间充质干细胞增殖的方法,包括:在光波长为400~480nm、光强度为95~105μw/cm2的条件下,通过准直镜用蓝光照射准直镜下95~105mm处人脐带间充质干细胞85~95min,进行负向调控;或者通过准直镜用蓝光照射准直镜下95~105mm处人脐带间充质干细胞115~125min,进行正向调控。本发明首次仅通过特定参数设置下的蓝光照射达到双向操控人脐带间充质干细胞增殖速度的目的,不需要在干细胞中转入外源基因、不涉及病毒转染载体,不添加任何其它物质,更加符合“无创光医疗”的临床应用需求,具有广阔的临床应用前景。
搜索关键词: 一种 基因 修饰 操控 双向 调节 脐带 间充质 干细胞 增殖 方法
【主权项】:
1.非基因修饰光操控负向调节间充质干细胞增殖的方法,在光波长为400~480nm、光强度为95~105μw/cm2的条件下,通过准直镜用蓝光照射准直镜下95~105mm处人脐带间充质干细胞85~95min,步骤如下:(1)人脐带间充质干细胞的原代培养:取分离的人脐带间充质干细胞,接入脐带间充质干细胞增殖培养基中,在36~38℃、5%CO2条件下培养3~4天,细胞密度达到80%~90%,制得原代培养后细胞;(2)人脐带间充质干细胞的传代培养:取步骤(1)制得的原代培养后细胞,冲洗掉残余培养基,胰酶溶液进行细胞消化,进行细胞混悬,然后转接至脐带间充质干细胞增殖培养基中,36~38℃、5%CO2条件下进行细胞培养3~4天,获得传代细胞;(3)蓝光照射细胞:取步骤(2)获得的传代细胞,在光波长为400~480nm、光强度为95~105μw/cm2的条件下,照射85~95min,制得照射后细胞;(4)人脐带间充质干细胞的增殖培养:将所述步骤(3)制得的照射后细胞进行增殖培养。
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