[发明专利]一种血小板膜蛋白CD36抗原基因分型的PCR-SBT方法及试剂有效
| 申请号： | 201810460870.5 | 申请日： | 2018-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN108660198B | 公开（公告）日： | 2022-02-22 |
| 发明（设计）人： | 丁浩强;付涌水;叶欣 | 申请（专利权）人： | 广州血液中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6883 |
| 代理公司： | 广州市南锋专利事务所有限公司 44228 | 代理人： | 刘媖 |
| 地址： | 510095*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种CD36抗原分型的PCR‑SBT方法，它包括以下步骤制备人基因组DNA；提供扩增引物，用聚合酶链反应分别扩增CD36抗原的基因序列；将扩增产物进行双酶切纯化；提供测序引物，将纯化产物进行测序PCR反应；将测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；将获得的序列通过软件分析，确定其基因型。本发明还提供上述方法所用的试剂。本发明通过对CD36抗原5`端及1‑15外显子的基因序列分别进行序列测序，获得CD36抗原基因分型的寡核苷酸序列，精确地对其基因进行定型。本发明对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 血小板 膜蛋白 cd36 抗原 基因 pcr sbt 方法 试剂 | ||
【主权项】：
1.一种血小板膜蛋白CD36抗原基因分型的PCR‑SBT方法及试剂，其特征在于它由用于扩增的引物和用于测序分析的寡核苷酸测序引物组成； 所述用于扩增的引物为 CD36抗原基因序列的扩增引物，其方法包括以下步骤 ：(1)提供扩增引物，使用离心干燥机把引物干燥置于可拆分96孔PCR板底部，封膜后保存于‑20℃备用；(2)制备人基因组DNA ；(3)用聚合酶链反应分别扩增人基因组DNA中CD36抗原5`端及1‑15外显子的基因序列；(4)将步骤(3)得到的扩增产物进行双酶切纯化；(5)提供测序引物，将步骤(4)得到的纯化产物进行测序PCR反应；(6)将步骤(5)得到的测序产物进行醋酸钠‑乙醇沉淀法纯化，进行毛细管电泳测序；(6)将步骤(6)获得的序列通过软件分析，确定其基因型。
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