[发明专利]一种生物3D打印全定制皮肤及其制备方法

摘要

本发明涉及组织工程皮肤技术领域，具体为一种生物3D打印全定制皮肤及其制备方法，包括两个部分，一个部分是皮肤干细胞的提取技术，一个部分是皮肤的生物3D重塑技术。皮肤干细胞提取包括：组织获取及处理、组织酶解、原代细胞培养、传代培养等。利用生物3D打印机，采用三维扫描建模技术，打印原料及打印规格计算、基底打印、分层打印，逐层堆叠的方法，打印出能完全符合人体的特定部位、特定三维特征的全定制皮肤，保证了人造皮肤与伤口的完全贴合，提高了移植成功率和治愈效果。同时，全定制皮肤也可用于体外皮肤模型的研究，在肿瘤研究、药物及化妆品测试等方面发挥巨大作用。

主权项

1.一种生物3D打印全定制皮肤及其制备方法，其特征在于，包括如下依次进行的步骤：3D扫描和皮肤建模，使用三维扫描仪对人体皮肤受损部位进行扫描，得到皮肤受损部位的三维结构，再用软件计算出伤口需要移植的全定制皮肤各个属性，包括：PDMS基底三维模型和皮肤构造模型；建立符合皮肤受损部位三维结构的皮肤模型，使得全定制皮肤完全贴合伤口，预估出需要干细胞的数量；细胞提取，提取0.1‑0.3g人体皮肤组织，经过清洗、消毒、称重、切碎得到初步处理好的皮肤组织，加入相应的蛋白酶和胶原酶进行组织酶解，得到游离的皮肤细胞组织液；过滤得到细胞液，离心聚集细胞，再将细胞接种到培养皿，得到原代皮肤细胞；原代培养，取一部分原代细胞，添加ROCK抑制剂进行培养，经过传代培养，得到所需要量的表皮干细胞；取一部分原代细胞，不添加ROCK抑制剂进行培养，经过传代培养，培养出所需要量的真皮干细胞；3D分层打印，先通过3D打印机打印出PDMS皮肤基底；在PDMS基底上打印胶原凝胶层，胶原凝胶层上打印真皮细胞层，在真皮细胞层上打印胶原凝胶层，在胶原凝胶层上打印表皮细胞层，在表皮细胞层上再打印胶原凝胶层；皮肤组织培养及移植，将打印好的全定制皮肤转移到培养皿中，恒温箱气液界面培养2‑10日，待皮肤组织初步融合，再移植到皮肤受损部位或进行体外皮肤模型试验。