[发明专利]金钗石斛总生物碱的提取及纯化和含量测定方法

摘要

本发明公开了一种金钗石斛总生物碱的提取及纯化和含量测定方法，属于生物医药技术领域。其包含1).称取金钗石斛，粉碎；2).溶剂浸泡煎煮；3).酸液处理；4).萃取浓缩；5).再次酸液处理；6).柱层析分离提纯；7).真空冷冻干燥。本发明方法提取纯化的金钗石斛总生物经气象色谱测定法和酸性染料比色测定法测定，石斛总生物碱含量为80‑90％，效果突出。

主权项

1.一种金钗石斛总生物碱的提取纯化方法，其特征在于包含以下步骤：1).称取金钗石斛，粉碎后备用；2).用溶剂将金钗石斛粉分别浸泡煎煮2‑3次，每次2小时，过滤合并滤液；3).将步骤2)所得滤液用pH＝3.5的盐酸溶液处理，搅拌充分后过滤，收集滤液；4).将步骤3)所得滤液用石油醚按1:1的比例萃取，去石油醚层，再用氨水调节液体至pH＝10，再用氯仿按1.2:1比例萃取两次，收集氯仿层，浓缩后制得膏状；5).将步骤4)制得的浸膏用双蒸水配制的pH为2‑3.5的盐酸溶液处理，过滤，收集滤液；6).将步骤5)所得滤液用钠型离子交换树脂柱分离提纯，用蒸馏水冲洗至无色，再用60％‑85％的乙醇冲洗至无色，再用25％氨水加在80％的乙醇里面调pH为10‑11后冲洗柱子，用10％硅钨酸检测，浓缩冲洗液，制得金钗石斛总生物碱；7).将步骤6)制得的金钗石斛总生物碱用真空冷冻干燥机干燥，即得。