[发明专利]一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂在审
| 申请号： | 201810473041.0 | 申请日： | 2018-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN108642004A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 蒲锋星;刘世宇;邓志宏 | 申请（专利权）人： | 广东芙金干细胞再生医学有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 523808 广东省东莞市松山湖高新技术产业开*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种外泌体的制备方法及含有外泌体的干细胞增殖试剂。该外泌体的制备方法包括：步骤一：将不含外泌体血清的培养基加入到骨髓间充质干细胞中，将其稀释成细胞悬液接种于细胞培养瓶中培养，收取培养后的上清液，进行外泌体的提取；步骤二：去除所述上清液中的细胞碎片、死细胞和杂质；去除上清液后加入磷酸缓冲盐溶液PBS溶解收集外泌体沉淀，使用无菌滤膜过滤，并将所得的所述外泌体沉淀分装于无菌离心管中，保存备用。该方法通过体外实验证明早代的骨髓间充质干细胞分泌的外泌体与人脐带间充质干细胞共培养可显著促进间充质干细胞的增殖活性及相关功能，是潜在改善大规模细胞培养过程中细胞功能的有效策略。 | ||
| 搜索关键词： | 上清液 制备 骨髓间充质干细胞 干细胞增殖 去除 沉淀 人脐带间充质干细胞 大规模细胞培养 磷酸缓冲盐溶液 间充质干细胞 细胞悬液接种 无菌离心管 细胞培养瓶 体外实验 无菌滤膜 细胞功能 细胞碎片 有效策略 增殖活性 培养基 死细胞 血清 分装 稀释 分泌 备用 过滤 溶解 保存 | ||
【主权项】：
1.一种外泌体的制备方法，其特征在于，包括：步骤一、骨髓间充质干细胞上清的制备：将不含外泌体血清的培养基加入到骨髓间充质干细胞中，将其稀释成细胞悬液接种于细胞培养瓶中培养，收取培养后的上清液，进行外泌体的提取；步骤二、骨髓间充质干细胞外泌体的分离存化：去除所述上清液中的细胞碎片、死细胞和杂质；去除上清液后加入磷酸缓冲盐溶液PBS溶解收集外泌体沉淀，使用无菌滤膜过滤，并将所得的所述外泌体沉淀分装于无菌离心管中，保存备用。
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