[发明专利]一种酰胺化果胶的制备方法

摘要

本发明涉及一种酰胺化果胶的制备方法，将风干粉碎后的橙皮，采用温和提取方法制备成果胶清液，采用植物果胶甲酯酶对果胶清液酶解，最终得到粉末初始果胶，对粉末初始果胶进行酰胺化反应，即得酰胺化果胶，所得酰胺化果胶具有高分子量和可控制的嵌段结构,达到欧盟（EU）对酰胺化果胶的质量要求标准。应用于酸奶中，可显著增加酸奶稠度，且长时间放置，酸奶不产生稠度下降和析水现象。此外，该发明制备的酰胺化果胶可显著改变肠道菌群，促进肠道益生菌的增长。

主权项

1.一种酰胺化果胶的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：1） 酒精不溶物（AIS）制备： 取风干粉碎后的橙皮， 加入3～4倍体积90%（v/v）酒精，90℃下缓慢搅拌10～20min，酒精可溶物，包含小分子糖和色素经离心除去，酒精不溶物60℃ 烘干 6 h，粉碎备用；2） 制备初提悬浮液： 称取上述酒精不溶物AIS，加入到40～60℃去离子水中， AIS和去离子水的质量比为1:10～1:30，用浓硝酸调pH至2.0～2.5， 在温度为40～60℃，转速为400rpm条件下，搅拌提取1～3h，得初提悬浮液；3）制备果胶清液： 将步骤2）得到的初提悬浮液通过真空转鼓过滤机过滤， 所得滤液即为果胶清液；4） 酶解： 将步骤3） 得到的清液加入到不锈钢保温罐中， 维持温度在45～55℃，采用10%碳酸钠溶液调节酶解pH4.0～4.5，向清液中加入浓缩液质量20～50ppm的果胶甲酯酶开启搅拌，在转速100rpm条件下反应， 当清液的酯化度达到所需要的酯化度时，停止反应；5） 灭酶： 将步骤4）得到的清液在温度75～85℃， pH2.0～2.5条件下灭酶10～15min，然后迅速冷却至50℃以下；6） 超滤： 将步骤5）灭酶后的清液采用截留相对分子量为1000u的超滤膜对果胶清液进行超滤，加入去离子水洗涤浓缩至原体积1/3‑1/4；7）制备洗涤滤饼：向步骤6）的浓缩液中加入70%的乙醇， 浓缩液和70%的乙醇的体积比为1:3， 过滤， 得滤饼， 用70%乙醇洗涤3～5次，每次洗涤所用70%乙醇和滤饼的质量比为5～10:1，并搅拌30min， 得洗涤滤饼；8）制备粉末初始果胶：将步骤7）得到的洗涤滤饼在60℃条件下干燥，干燥后粉碎筛分，获得粉末初始果胶；9）制备醇氨溶液的制备：浓氨水与70%乙醇混合得到醇氨溶液，醇氨溶液中氨浓度为3%～5%；10）制备酰胺化果胶悬浮液：将步骤9） 制备的醇氨溶液与步骤8） 制备的粉末滤饼按4:1（v/w） 的比例混合， 在温度为6℃， 转速为100r/min条件下,搅拌3‑6h，得酰胺化果胶悬浮液；11）制备应用于酸奶的酰胺化果胶： 将步骤10）获得的酰胺化果胶悬浮液过滤， 得到一次滤饼， 向一次滤饼中加入60%乙醇，一次滤饼和60%乙醇的（w/v）为1:2，在60rpm条件下搅拌30min，过滤，得二次滤饼，向二次滤饼中加入50～70%乙醇，二次次滤饼和50～70%乙醇的（w/v）为1:2， 在60rpm条件下搅拌30min， 过滤， 得三次滤饼，向三次滤饼中加入60%乙醇，三次滤饼和60%乙醇的（w/v） 为1:2，加入62～65% w/w浓硝酸， 调节pH为4.2， 过滤，得四次滤饼， 将第四次滤饼进行干燥至水分含量≤10%，后经粉碎，筛分后，即得应用于酸奶的酰胺化果胶；所述浓硝酸质量浓度为浓度62～65% ；所述果胶甲酯酶是从橙皮中分离出来的，可脱酯产生可控制的嵌段结构的果胶的甲酯酶； 植物果胶甲酯酶是沿着分子单链，从果胶分子的还原性末端或其邻近的游离羧基开始进攻除去甲氧基，形成具有一定分区嵌段结构的脱酯果胶。