[发明专利]基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo-B敲除模式小鼠的方法及应用在审
| 申请号： | 201810480921.0 | 申请日： | 2018-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN108642090A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 高利利 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司 11514 | 代理人： | 邹成娇 |
| 地址： | 100036*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法及应用，获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法包括步骤：设计高效的识别特定基因EGE‑ZXH‑007的sgRNA；将sgRNA连入质粒载体上，然后进行体外转录，得到可进行显微注射的Cas9/sgRNA；将可进行显微注射的Cas9/sgRNA显微注射到小鼠受精卵中，然后对出生的小鼠进行基因型检测和鉴定，确认最终得到Nogo‑B敲除模式小鼠。本发明采用CRISPR/Case9技术制备Nogo‑B敲除模式小鼠，与传统基因敲除技术相比，更易于操作，效率更高，更容易得到纯合子突变，为进一步研究Nogo‑B的功能打下良好的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 敲除 模式小鼠 显微注射 技术获得 基因型检测 小鼠受精卵 传统基因 体外转录 质粒载体 纯合子 小鼠 制备 突变 应用 基因 研究 | ||
【主权项】：
1.一种基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法，其特征在于，包括步骤：设计高效的识别特定基因EGE‑ZXH‑007的sgRNA；将所述sgRNA连入质粒载体上，然后进行体外转录，得到可进行显微注射的Cas9/sgRNA；将所述可进行显微注射的Cas9/sgRNA显微注射到小鼠受精卵中，然后对出生的小鼠进行基因型检测和鉴定，确认最终得到Nogo‑B敲除模式小鼠。
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