[发明专利]基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo-B敲除模式小鼠的方法及应用在审

专利信息
申请号: 201810480921.0 申请日: 2018-05-18
公开(公告)号: CN108642090A 公开(公告)日: 2018-10-12
发明(设计)人: 高利利 申请(专利权)人: 中国人民解放军总医院
主分类号: C12N15/90 分类号: C12N15/90;A01K67/027
代理公司: 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司 11514 代理人: 邹成娇
地址: 100036*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法及应用,获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法包括步骤:设计高效的识别特定基因EGE‑ZXH‑007的sgRNA;将sgRNA连入质粒载体上,然后进行体外转录,得到可进行显微注射的Cas9/sgRNA;将可进行显微注射的Cas9/sgRNA显微注射到小鼠受精卵中,然后对出生的小鼠进行基因型检测和鉴定,确认最终得到Nogo‑B敲除模式小鼠。本发明采用CRISPR/Case9技术制备Nogo‑B敲除模式小鼠,与传统基因敲除技术相比,更易于操作,效率更高,更容易得到纯合子突变,为进一步研究Nogo‑B的功能打下良好的基础。
搜索关键词: 敲除 模式小鼠 显微注射 技术获得 基因型检测 小鼠受精卵 传统基因 体外转录 质粒载体 纯合子 小鼠 制备 突变 应用 基因 研究
【主权项】:
1.一种基于CRISPR/Cas9技术获得Nogo‑B敲除模式小鼠的方法,其特征在于,包括步骤:设计高效的识别特定基因EGE‑ZXH‑007的sgRNA;将所述sgRNA连入质粒载体上,然后进行体外转录,得到可进行显微注射的Cas9/sgRNA;将所述可进行显微注射的Cas9/sgRNA显微注射到小鼠受精卵中,然后对出生的小鼠进行基因型检测和鉴定,确认最终得到Nogo‑B敲除模式小鼠。
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