[发明专利]一种胎儿染色体非整倍体检测中DNA的提取方法在审
| 申请号： | 201810484117.X | 申请日： | 2018-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN108642047A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 余艳;李慧源 | 申请（专利权）人： | 长沙金域医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410000 湖南省长沙市高新开发区麓天路*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本申请公开一种胎儿染色体非整倍体检测中DNA的提取方法，包括：步骤一：缓冲液及试剂进行处理，步骤二：向血浆管中加入20UL Proteinase K和30UL Magpure Particles G，震荡混匀；加入500UL Buffer MLF，涡旋混匀；将血浆管转移到预热至37℃的恒温混匀仪中，转速调至1000rpm；置磁力架上3min，澄清后弃液，取下离心管；加入500UL Buffer MW I，振荡混匀，瞬时离心，置磁力架3分钟，吸附完全后吸出管内液体；步骤三：加入500UL Buffer MW II，振荡混匀，瞬时离心，置磁力架，吸附完全后吸出管内液体；步骤四：加入预热至37.0℃的Buffer AE，重悬磁珠，静至；步骤五：高速微离，置磁力架上，澄清后吸取DNA溶液到对应编号的1.5mL新管中，得到提取的DNA溶液；DNA提取合格率更高、保存和质控更合理明晰。 | ||
| 搜索关键词： | 磁力架 胎儿染色体 非整倍体 振荡混匀 吸出管 血浆管 预热 混匀 吸附 澄清 恒温混匀仪 缓冲液 离心管 检测 磁珠 弃液 取下 涡旋 质控 重悬 震荡 合格率 保存 申请 | ||
【主权项】：
1.一种胎儿染色体非整倍体检测中DNA的提取方法，其特征在于，包括：步骤一：对血浆游离DNA提取试剂盒中的缓冲液及试剂进行处理，根据实验样本数，准备相应数量的1.5mL离心管，并写上相应的样本编号；按照DNA提取记录表中的血浆编号，将所需400uL血浆从‑80℃冰箱取出，室温溶解；步骤二：向血浆管中加入20UL Proteinase K和30UL Magpure Particles G，震荡混匀；加入500UL Buffer MLF，涡旋混匀；将血浆管转移到预热至37℃的恒温混匀仪中，转速调至1000rpm；置磁力架上3min，澄清后弃液，取下离心管；加入500UL Buffer MW I，振荡混匀，瞬时离心，置磁力架3分钟，吸附完全后吸出管内液体；步骤三：加入500UL Buffer MW II，振荡混匀，瞬时离心，置磁力架，吸附完全后吸出管内液体；瞬时离心，置磁力架上收集管壁上的液滴，吸去残留的液体；打开离心管管盖，晾干磁珠；步骤四：加入预热至37.0℃的Buffer AE，重悬磁珠，静至；期间轻轻晃荡两次使DNA充分洗脱，操作时不要让液体弹到管壁上；步骤五：高速微离，置磁力架上，澄清后吸取DNA溶液到对应编号的1.5mL新管中，得到提取的DNA溶液。
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