[发明专利]一种重组含双发色团光受体蛋白古紫质4及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201810485893.1 | 申请日： | 2018-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN108640982A | 公开（公告）日： | 2018-10-12 |
| 发明（设计）人： | 赵欣;孙超;丁小燕;崔浩琳 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C07K14/215 | 分类号： | C07K14/215;C12N15/74;C12N1/21;C12N15/31;G01N24/08;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海蓝迪专利商标事务所(普通合伙) 31215 | 代理人： | 徐筱梅;张翔 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组含双发色团光受体蛋白古紫质4及其构建方法和应用，所述光受体蛋白古紫质4是将aR4基因克隆入pMPK66表达载体构建表达质粒pMPK66‑aR4，随后将其转入嗜盐杆菌MPK409宿主细胞，并经过5‑氟乳清酸和洛伐他汀双重抗性筛选，采用完全培养基和蛋白胨培养基分阶段调控混合培养而得；所得蛋白不仅含有第一发色团视黄醛以及第二发色团菌红素，同时具有天然的三聚体结构。本发明利用基因工程构建pMPK66‑ar4表达质粒，原生质法转化嗜盐杆菌MPK409、5‑氟乳清酸和洛伐他汀多重抗性筛选，完全培养基和蛋白胨培养基逐步、高产率制备重组含双发色团的古紫质4蛋白的完整流程。本发明还提供了重组含双发色团的光受体蛋白古紫质4在结构生物学研究中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白 双发色团 光受体 构建 蛋白胨培养基 完全培养基 表达质粒 洛伐他汀 发色团 乳清酸 盐杆菌 应用 基因工程构建 结构生物学 三聚体结构 表达载体 混合培养 基因克隆 抗性筛选 双重抗性 宿主细胞 分阶段 高产率 视黄醛 天然的 制备 筛选 转入 调控 转化 研究 | ||
【主权项】：
1.一种重组含双发色团光受体蛋白古紫质4，其特征在于，该蛋白是将aR4基因克隆入pMPK66表达载体构建表达质粒pMPK66‑aR4，随后将其转入嗜盐杆菌MPK409宿主细胞，并经过5‑氟乳清酸和洛伐他汀双重抗性筛选，采用完全培养基和蛋白胨培养基分阶段调控混合培养而得；所得蛋白不仅含有第一发色团视黄醛以及第二发色团菌红素，同时具有天然的三聚体结构。
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