[发明专利]载有神经细胞生长因子的硫酸软骨素纳米微球的制备方法

摘要

本发明提供一种载有神经细胞生长因子的硫酸软骨素纳米微球的制备方法，利用硫酸软骨素微球作为载体，包裹神经细胞生长因子，经实验证实，硫酸软骨素微球可以对神经细胞生长因子进行良好的包载和包封，并且可以在较长时间内对神经细胞生长因子的释放进行良好的控制。载体在给药后无需再次取出，在体内可以降解并代谢，其分解产物及代谢产物对人体健康无害，可在制备促神经组织修复药物中的应用。

主权项

1.一种载有神经细胞生长因子的硫酸软骨素纳米微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)量取1～20ml医用石蜡油，玻璃棒引流，缓慢加入圆底烧瓶中，然后加入0.1～1ml的司盘80，超声充分搅拌1h，搅拌条件为600rpm，混匀圆底烧瓶中的液体，形成10ml的油相体系；(2)以0.1～5ml的20mg/ml硫酸软骨素溶液作为水相，取0.5～5μg NGF加入到水相中；(3)然后用1ml移液器吸取水相缓慢地加入到油相中，于500rpm下搅拌30min，充分混匀形成乳浊液；(4)在乳浊液中缓慢加入10～100μl的10％京尼平水溶液，于1500rpm下搅拌1h；(5)搅拌停止后，将圆底烧瓶中所有混合液倒入50ml无菌离心管中，于1200rpm下离心10min，静置，去除上清液；(6)向离心管中加入10～50ml石油乙醚洗涤2次，每次充分振荡该离心管，使石油乙醚与管中的混合液充分接触，然后于室温、1000rpm条件下离心10min，静置，吸掉上清液；(7)加入10～50ml异丙醇洗涤2次，每次充分振荡该离心管，使异丙醇与管中的混合液充分接触，然后于室温、1000rpm条件下离心10min，静置，吸掉上清液；(8)加入10～50ml丙酮洗涤2次，每次充分振荡该离心管，使丙酮与管中的混合液充分接触，然后于室温、1000rpm条件下离心10min，静置，吸掉上清液；(9)室温条件下自然干燥NGF‑CSMSs，最后收集，于室温、干燥处保存备用。