[发明专利]视网膜节细胞的制备方法在审
申请号: | 201810490491.0 | 申请日: | 2018-05-21 |
公开(公告)号: | CN110305846A | 公开(公告)日: | 2019-10-08 |
发明(设计)人: | 陈舒怡;郝莉莉;王静 | 申请(专利权)人: | 中山大学中山眼科中心 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/85 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510060 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供一种视网膜节细胞的制备方法,包括如下步骤:获取体细胞;构建慢病毒颗粒,用所述慢病毒颗粒转染所述体细胞,从而将Ascl1基因、Islet1基因、Brn3b基因整合到体细胞染色体上;诱导培养,获得视网膜节细胞。所得到的视网膜节细胞,通过将外源Ascl1基因、Islet1基因、Brn3b基因整合到小鼠成纤维细胞染色体上过表达制备获得。与现有技术相比,本发明创造性地挑选Ascl1基因、Brn3b基因和Islet1基因的组合,通过慢病毒介导的方式使这三个转录因子在体细胞中过表达,能够在诱导培养7天的情况下,实现超过10%的体细胞转分化为Brn3a阳性、Tuj1阳性的视网膜神经节样细胞,效率高。 | ||
搜索关键词: | 视网膜节细胞 基因 体细胞 制备 慢病毒颗粒 基因整合 诱导培养 小鼠成纤维细胞 体细胞染色体 视网膜神经 转录因子 慢病毒 染色体 构建 介导 外源 转染 分化 细胞 | ||
【主权项】:
1.一种视网膜节细胞,其特征在于,通过将外源Ascl1基因、Islet1基因、Brn3b基因整合到小鼠成纤维细胞染色体上过表达制备获得。
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