[发明专利]一种白及组培苗一次性成苗的方法

摘要

本发明公开了一种白及组培苗一次性成苗的方法，在白及组培苗的增殖培养和生根培养阶段均在无菌播种的培养基上完成，只需配制一次培养基，在培养瓶苗中依次加入增殖诱导剂和生根结鳞茎诱导剂，就可将白及从种子到生根结鳞茎组培苗一次性完成，可出瓶炼苗。在增殖倍数不减少情况下，组培苗生长健壮，根系发达。与常规组培快繁技术相比只需配制一次培养基，增殖和生根环节无需再配制培养基和进行转接，节约了2次以上培养基的成本，节省了大量转瓶接种的时间，简化组培程序，可大大降低白及组培苗生产成本，节约成本一半以上。而且本方法操作简单，生产成本低，可在短时间内生产出大量优质种苗，为白及优质低价的种苗繁育提供技术支持和保障。

主权项

1.一种白及组培苗一次性成苗的方法，其特征在于包括以下步骤：（1)在超净工作台上，将清洗干净的白及蒴果用0.2%升汞进行灭菌处理10 min，用无菌水清洗3次，用无菌纸吸干表面水滴，用手术刀把蒴果切开，将少量种子均匀撒在培养瓶的MS培养基表面，将培养瓶盖子盖好，放到培养室中培养，7～12 d时，种子开始膨大变绿，15～25 d时，种子开始萌发出小芽，60 d时，长成高为1～3 cm的小芽，有部分小芽长有根；（2）在超净工作台上，将步骤（1）中长有小芽的培养瓶的表面用75%的酒精灭菌，打开培养瓶的瓶盖，将灭菌过的增殖诱导剂加入培养瓶中，每瓶加入5～10 ml，培养瓶放到培养室中培养，培养45～55 d，原小芽上长出3～6个新的小芽，形成丛生芽；所述增殖诱导剂由营养液和植物生长调节剂（单位为mg/L）两部分组成；营养液组成为：KNO3 1900、CaCl2.H2O 440、MgSO4.7H2O 370、KH2PO4 170、KI 0.83、H3BO3 6.2、MnSO4.4H2O 22.3、ZnSO4 8.6、Na2MoO4.H2O 0.25、CuSO4.5H2O 0.025、CoCl2.6H2O 0.025、FeSO4.7H2O 27.8、Na2‑EDTA.2H2O 37.3、肌醇100、烟酸0.5、盐酸吡哆醇0.5、盐酸硫胺素0.1、甘氨酸2；植物生长调节剂组成为：6‑BA 0.5～2 + CPPU 0.1～1.0 + NAA 0.1～0.5，pH值为6.2；（3）在超净工作台上，将步骤（2）中的长有丛生芽的培养瓶表面用75%的酒精灭菌，打开培养瓶的瓶盖，将灭菌过的生根结鳞茎诱导剂加入培养瓶中，每瓶加入5～10 ml，培养55～65 d，丛生芽上每个小芽的基部都长有假鳞茎，形成丛生假鳞茎，根数为2～8条，可出瓶炼苗；所述生根结鳞茎诱导剂由营养液和植物生长调节剂（单位为mg/L）两部分组成；营养液组成为：KNO3 1000、CaCl2.H2O 440、MgSO4.7H2O 185、KH2PO4 170、KI 0.415、H3BO3 3.1、MnSO4.4H2O 11.15、ZnSO4 4.3、Na2MoO4.H2O 0.125、CuSO4.5H2O 0.0125、CoCl2.6H2O 0.0125、FeSO4.7H2O 13.9、Na2‑EDTA.2H2O 18.65、肌醇 50、烟酸0.25、盐酸吡哆醇0.25、盐酸硫胺素0.05、甘氨酸1；植物生长调节剂组成为：IBA 0.5～2.0 + IAA 0.1～1.0+KT 0.1～0.5，pH值为6.5。