[发明专利]一种利用高效液相色谱仪测定柚子中吡唑醚菌酯残留量的方法

摘要

本发明公开一种利用高效液相色谱仪测定柚子中吡唑醚菌酯残留量的方法,其包括配制标准溶液、并通过调整高效液相色谱仪检测条件得到吡唑醚菌酯的线性标准工作方程，然后将柚子皮、柚子肉和柚子全果样品分别切碎、匀浆后用乙睛提取，盐析，弗罗里硅土层析柱净化，用体积比为1:9的丙酮：正己烷混合液洗脱，洗脱液浓缩后用色谱乙腈定容后，过膜，采用高效液相色谱仪紫外检测器测定，基质外标法定量。通过试验确证,本发明方法的灵敏度、准确度和精密度均满足农药残留分析的技术要求，具有操作简单、易于普及掌握,且成本低,重复性好、定性定量准确的优点。

主权项

1.一种利用高效液相色谱仪测定柚子中吡唑醚菌酯残留量的方法,其特征在于包括：步骤一：根据吡唑醚菌酯的性质选定高效液相色谱仪检测条件为：检测器采用紫外检测器；色谱柱长度为250mm×4.6mm，粒径为5u的Agilent Zorbax‑C18色谱柱,柱温为30℃，流速为0.6mL/min，进样量为20uL，流动相为乙腈和水，乙腈和水溶液的体积比为70：30，波长为278nm,保留时间12.6min；步骤二：标准溶液的配制准确称取质量浓度为97.0％的吡唑醚菌酯标准品，用色谱乙腈溶解并配制成吡唑醚菌酯质量浓度为1000.0mg/L的标准母液，并采用梯度稀释法用色谱乙腈稀释配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、2.00及5.00mg/L的标准工作溶液，在选定的高效液相色谱仪检测条件下进行测定，以吡唑醚菌酯的质量浓度C为横坐标、相应的色谱峰面积A1为纵坐标绘制标准工作曲线，得出吡唑醚菌酯线性方程为：A1＝120.62C+0.3032，线性方程的相关系数R2≥0.9999，由此确定，步骤一选定的高效液相色谱仪检测条件能进行柚子样品的定性和定量分析；步骤三：样品前处理将待测的柚子皮、柚子肉和柚子全果样品分别进行切碎，然后匀浆，分别得到柚子皮、柚子肉和柚子全果样品；步骤四：吡唑醚菌酯的提取分别准确称取已制备好的柚子全果、柚子肉和柚子皮样品20.0g，置于具塞瓶中，加入80mL乙腈，在35℃下振荡提取0.5‑1h，之后经布氏漏斗减压抽滤，收集全部滤液转移到已加入5gNaCl的具塞筒中，摇匀，取40mL上清液，在旋转蒸发仪上于45℃浓缩至近干，形成提取浓缩液，其中柚子全果和柚子皮样品提取浓缩液待弗罗里硅土层析柱净化，柚子肉提取浓缩液用色谱乙腈定容至5.0mL，过0.45μm有机系滤膜，得到柚子肉样品待测溶液，待HPLC检测；步骤五：柚子全果和柚子皮样品提取浓缩液的净化将弗罗里硅土层析柱从下至上依次装填脱脂棉、2cm厚无水硫酸钠、5g弗罗里硅土、2cm厚无水硫酸钠，在装柱的过程中要敲紧敲实，在弗罗里硅土净化层析柱装好后，先用10mL体积比为1:9的丙酮和正己烷混合液预淋洗，再将步骤四得到的柚子全果或柚子皮的提取浓缩液全部移入弗罗里硅土层析净化柱中，用50mL体积比为1:9的丙酮和正己烷混合液进行少量多次淋洗，收集全部淋出液转入旋转蒸发仪上于40℃浓缩近干，再用色谱乙腈定容至5.0mL，过0.45μm有机系滤膜，得到柚子全果或柚子皮样品待测溶液，待HPLC检测；步骤六：残留量测定结果的计算运用步骤一中选定的高效液相色谱仪检测条件对步骤四得到的柚子肉样品待测溶液和步骤五得到的柚子全果或柚子皮样品待测溶液mg，V mL进行HPLC测定，测得柚子全果、柚子肉或柚子皮样品待测溶液中吡唑醚菌酯的色谱峰面积A2，代入残留量计算公式，求得柚子全果、柚子肉或柚子皮样品待测溶液中吡唑醚菌酯的质量浓度X，即得样品待测溶液中吡唑醚菌酯的残留量，其中残留量计算公式如下：式中：X－样品待测溶液中吡唑醚菌酯的残留量，mg/kg；C－标准工作溶液中吡唑醚菌酯的浓度，mg/L；V－样品最终定容体积，mL；A1－标准工作溶液中的吡唑醚菌酯色谱峰面积；A2－样品待测溶液中的吡唑醚菌酯的色谱峰面积；m－样品质量，g。