[发明专利]基于骨脱细胞支架的人多发性骨髓瘤微环境模型的构建方法有效

专利信息
申请号: 201810512446.0 申请日: 2018-05-25
公开(公告)号: CN108795866B 公开(公告)日: 2021-06-08
发明(设计)人: 戚菁;李晓红;郭益冰;徐联成;姚俊中;陆晶晶;申娴娟;朱慧;鞠少卿;顾志峰 申请(专利权)人: 南通大学附属医院
主分类号: C12N5/09 分类号: C12N5/09
代理公司: 南通市永通专利事务所(普通合伙) 32100 代理人: 葛雷
地址: 226001*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于骨脱细胞支架的人多发性骨髓瘤微环境模型的构建方法,包括骨脱细胞支架制备、骨脱细胞支架脱细胞效果评价、钴60辐照灭菌、人多发性骨髓瘤细胞接种等步骤。本发明提供了一种人多发性骨髓瘤微环境模型的建立方法,解决目前多发性骨髓瘤模型难以模拟体内真实环境的问题,为多发性骨髓瘤疾病的进一步研究提供了一种细胞模型。
搜索关键词: 基于 细胞 支架 多发性 骨髓瘤 环境 模型 构建 方法
【主权项】:
1.一种基于骨脱细胞支架的人多发性骨髓瘤微环境模型的构建方法,其特征是:包括下列步骤:(1)骨脱细胞支架制备无菌消毒后,取已处死大鼠的颅骨骨片后双蒸水冲洗、洗脱剂混合溶液摇床震荡洗涤、双蒸水冲洗去除残余试剂,得到骨脱细胞支架;(2)骨脱细胞支架脱细胞效果评价对骨脱细胞支架进行DNA残余量检测、HE染色、超微结构观察评价;(3)钴60辐照灭菌将干燥的脱细胞骨片进行钴60辐照灭菌,完成灭菌后无菌条件下浸泡于含有10%胎牛血清的DMEM或1640完全培养基的24孔细胞培养板中12h;(4)人多发性骨髓瘤细胞接种将人多发性骨髓瘤细胞按照2×104个/cm2的密度接种于骨片上,10%胎牛血清DMEM或1640完全培养基,37℃、5% CO2条件下培养72h,建立得到基于骨脱细胞支架的人多发性骨髓瘤微环境模型。
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