[发明专利]利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法及其应用

摘要

本发明公开一利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法，包括以下步骤:S1:准备血样本：S2:准备对照组和实验组：S3：染色第二实验组以及重悬第二对照组：S4：处理染色实验组：S5：核酸染色；S6：流式方法检测所述检测实验组；以及S7：分析所述分析结果，通过快速判断早期受损的红细胞中的DNA损伤信号的方式预测血液病的转归情况，具有特异性强以及灵敏度高的优势。

主权项

1.一利用红细胞DNA损伤信号预测血液病转归的方法，其特征在于，包括以下步骤:S1:准备血样本：获取血液疾病患者的抗凝血样本，按照1％体积比将所述抗凝血样本在室温环境下固定于1％‑4％的多聚甲醛溶液当中，固定10‑20分钟后，形成含有血样本的固定液；S2:准备对照组和实验组：分别取用相同体积的固定液设置为第一对照组和第一实验组，所述第一对照组和所述第一实验组均在室温环境下300‑400g离心,弃上清液，随后用1*PBS重悬清洗2‑3次，得到处理过后的第二对照组和处理过后的第二实验组；S3：染色第二实验组：取所述第二实验组加入Human FcR Binding，在4摄氏度下孵育15‑20分钟，随后使用染色缓冲剂在室温避光环境下染色所述第二实验组，得到第三实验组，其中所述染色缓冲剂为含RNase的染色试剂以及核酸染色剂的组合，染色15‑30分钟，其中所述含RNase的染色试剂为含第一标记物标记的CD235a以及第二标记物标记的CD47，所述核酸染色剂为含Hoechst33342和Thiazole orange的1×PBS，其中所述第一标记物不同于所述第二标记物；S4：重悬第二对照组：使用1*PBS重悬所述第二对照组，得到第三对照组；S5：流式方法检测所述第三实验组以及所述第三对照组：将所述第三实验组和所述第三对照组放置于流式细胞仪中检测，得到分析结果；以及S6：分析所述分析结果。