[发明专利]一种粒毛盘菌脂溶性黄色素的制备方法

摘要

本发明公开一种粒毛盘菌脂溶性黄色素(LPY‑3d)的制备方法，该方法具体步骤如下：保藏粒毛盘菌CCTCC No：M 209193的发酵液在45℃‑48℃进行真空浓缩，并经乙醇沉淀除多糖、蛋白后，利用真空旋转蒸发方法浓缩至原发酵液体积的三分之一；利用石油醚对浓缩发酵液进行萃取，获得石油醚萃取相，蒸去石油醚得黄色素粗品，再依次用硅胶G柱层析和ODS‑A反相C18柱层析纯化得到了一种黄色素LPY‑3d，通过质谱、红外与核磁对黄色素LPY‑3d的结构进行解析，确定了黄色素LPY‑3d是一种尚未见报道的四环三萜类黄色素。该方法简单易行，且黄色素LPY‑3d的纯度高。

主权项

1.一种粒毛盘菌脂溶性黄色素的制备方法，其特征在于，该方法具体步骤如下：(1)、从保藏粒毛盘菌CCTCC No：M 209193的斜面上取菌丝接种于固态培养基上，在25～28℃下活化培养72～96小时；固体培养基中各组分重量百分含量为：蔗糖1％，甘油1％，酵母粉0.5％，氯化镁0.03％，琼脂粉2％，余量为水；(2)、取1厘米*1厘米菌块接种至装有种子液培养基的三角瓶中；在25～28℃下、120～150r/min振荡培养72～96小时；种子液培养基中各组分重量百分含量为：蔗糖0.5％，甘油1％，酵母粉0.5％，氯化镁0.03％，余量为水；装液量是三角瓶体积的20％～40％；(3)、按发酵培养基体积的5～10％将种子液接种于装有发酵培养基的5L机械搅拌发酵罐；在0～96小时，25～28℃，搅拌转速为180～250r/min，通气量为3～4L/min；在96～144小时，28～30℃，搅拌转速为150～200r/min，通气量为2～3L/min；发酵培养基中各组分重量百分含量为：甘油0.8～3％，酵母粉0.1～0.4％，氯化镁0.03％，余量为水；(4)发酵液经过滤，弃滤渣，获滤液，抽滤、离心后取上清，收集后低温下浓缩，与三倍体积的无水乙醇混匀，4℃下静置12h，离心取上清液浓缩；上清液浓缩后，选用石油醚作为提取溶剂，料液体积比1:1萃取两次，用分液漏斗分离出石油醚萃取相，合并后浓缩、冻干得黄色素粗品LPY。