[发明专利]一种毛囊干细胞储存液及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 201810541479.8 申请日: 2018-05-30
公开(公告)号: CN108795854A 公开(公告)日: 2018-11-13
发明(设计)人: 徐智峰;张新 申请(专利权)人: 广州沙艾生物科技有限公司
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 北京华识知识产权代理有限公司 11530 代理人: 刘艳玲
地址: 510000 广东省广州市国际*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明具体公开了一种毛囊干细胞储存液及其制备方法和应用,所述储存液包括DMEM/F12、NaHC03、表皮生长因子(EGF)、类胰岛素生长因子‑I(IGF‑I)、氢化可的松、胎牛血清(FBS),头孢菌素,腺嘌呤、碱性成纤维细胞生长因子。本发明的毛囊干细胞储存液在利用利用贴壁法分离毛囊外根鞘细胞,在完全培养液中,4‑5天便可见毛囊外根鞘边缘向外游离生长出单个细胞,培养一周左右即可明显看到大量细胞从外根鞘边缘生长出来,其中混杂有上皮样形态细胞毛囊细胞分离培养与鉴定及毛囊体外重塑研究和成纤维形态细胞;随着游离生长细胞的增多,生长速率逐渐加快,在第15天左右时,细胞进入对数生长期。
搜索关键词: 储存液 毛囊干细胞 细胞 制备方法和应用 毛囊 游离 碱性成纤维细胞生长因子 培养液 类胰岛素生长因子 表皮生长因子 对数生长期 边缘生长 单个细胞 分离毛囊 分离培养 毛囊细胞 生长细胞 胎牛血清 头孢菌素 细胞进入 纤维形态 生长 上皮样 腺嘌呤 混杂 氢化 体外 贴壁 研究
【主权项】:
1.一种毛囊干细胞储存液,其特征在于,所述储存液包括DMEM/F12、NaHC03、表皮生长因子(EGF)、类胰岛素生长因子‑I(IGF‑I)、氢化可的松、胎牛血清(FBS),头孢菌素,腺嘌呤、碱性成纤维细胞生长因子;所述储存液中以DMEM培养液和F12培养液为基础液,DMEM培养液与F12培养液的比例为3‑6:1,NaHC03的浓度为3mg/mL~10mg/mL,表皮生长因子(EGF)的浓度为5ng/mL~20ng/mL,类胰岛素生长因子‑I(IGF‑I)的浓度为15ng/mL~50ng/mL,氢化可的松的浓度为200ng/L~300ng/L,胎牛血清的体积百分比为1%‑10%,头孢菌素的浓度为20ng/mL~50ng/mL,腺嘌呤的浓度为30μg/mL~80μg/mL,碱性成纤维细胞生长因子的浓度为8ng/mL~20ng/mL。
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