[发明专利]一种富含CD41+、CD81+微囊的血小板裂解液制备方法有效
| 申请号： | 201810561925.1 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108715834B | 公开（公告）日： | 2021-09-14 |
| 发明（设计）人： | 张怡;牛春玮;吕秀明;刘艳青 | 申请（专利权）人： | 天晴干细胞股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078;A61K38/19;A61K35/19;A61P17/02 |
| 代理公司： | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人： | 贾泽纯 |
| 地址： | 150028 黑龙江省哈尔滨市哈尔*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | 一种富含CD41+、CD81+微囊的血小板裂解液制备方法，本发明涉及一种富含CD41+、CD81+微囊的血小板裂解液制备方法，本发明的目的是为了提高血小板裂解液中CD41+、CD81+的微囊，本发明通过冲击波分级冲击，增加形成和释放了血小板中的细胞因子和CD41+、CD81+的微囊。本发明的血小板裂解液中含有的微囊浓度为120μg/mL，微囊总蛋白为7‑9μg/mL，有69.33±2.33％微囊粒径集中在30‑150nm范围，15.10±3.20％微囊粒径集中在150‑300nm范围，可以释放大量的血小板细胞因子，本发明应用于生物技术领域。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 富含 cd41 cd81 血小板 裂解 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种富含CD41+、CD81+微囊的血小板裂解液制备方法，其特征在于该制备方法按以下步骤进行：一、用聚焦式体外冲击波仪以频率15Hz，能流密度0.15～0.20mJ/mm2，室温下冲击富含血小板血浆或富含血小板生理盐水200‑500次后，37度孵育10‑15分钟；二、再以频率15Hz，能流密度0.20～0.25mJ/mm2，室温下冲击700‑1000次，37度孵育20‑30分钟；三、然后以频率15Hz，能流密度0.25～0.30mJ/mm2，室温下冲击1500‑2000次，37度孵育10分钟，得到悬液；四、将步骤三的悬液放入密封冻存管中，放入液氮冷冻20‑40分钟，取出后放入水浴摇荡融解，重复操作4‑6次，然后进行离心，取上清液，再用针头过滤器过滤上清液，收集滤液，得到富含CD41+、CD81+微囊的血小板裂解液。
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