[发明专利]一种人脑微血管生成模拟血脑屏障的体外构建方法有效
| 申请号： | 201810562096.9 | 申请日： | 2018-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN108823145B | 公开（公告）日： | 2022-04-05 |
| 发明（设计）人： | 吴扬;宫智勇;李岩 | 申请（专利权）人： | 武汉轻工大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人： | 胡海国 |
| 地址： | 430023 湖北省武*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开一种人脑微血管生成模拟血脑屏障的体外构建方法，包括以下步骤：配制成人脑微血管内皮细胞悬液和人脑星形胶质细胞悬液，配制纤维蛋白原母液和凝血酶母液；将内皮细胞悬液、星形胶质细胞悬液、DMEM培养基、纤维蛋白原母液和凝血酶母液混合，配制成混合细胞凝胶溶液；将混合细胞凝胶溶液注入到微流控芯片中，恒温孵育至凝胶化后，向所述微流控芯片中加入内皮细胞生长培养基，构建成3D细胞培养芯片；对所述3D细胞培养芯片进行连续培养，以使内皮细胞和星形胶质细胞生长至形成脑部微血管网络结构，即对应生成模拟血脑屏障。本发明提供的技术方案，成功建立了血脑屏障的体外模型，更清楚、准确地反应了血脑屏障的特性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 人脑 微血管 生成 模拟 血脑屏障 体外 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人脑微血管生成模拟血脑屏障的体外构建方法，其特征在于，包括以下步骤：将原代人脑微血管内皮细胞和原代人脑星形胶质细胞对应配制成内皮细胞悬液和星形胶质细胞悬液；向预热后的DPBS中加入牛血纤维蛋白原，配制成纤维蛋白原母液；将凝血酶溶解于DPBS中，配制成凝血酶母液；将内皮细胞悬液、星形胶质细胞悬液、DMEM培养基、纤维蛋白原母液和凝血酶母液混合，配制成混合细胞凝胶溶液；将混合细胞凝胶溶液注入到微流控芯片中，经过恒温孵育至所述混合细胞凝胶溶液凝胶化后，向所述微流控芯片的上室和下室中均加入内皮细胞生长培养基，并保持所述微流控芯片的上室和下室之间存在有培养基落差，每天更换培养基，构建成3D细胞培养芯片；对所述3D细胞培养芯片进行连续培养，以使内皮细胞和星形胶质细胞在所述3D细胞培养芯片上生长至形成脑部微血管网络结构，即对应生成模拟血脑屏障。
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