[发明专利]利用超高压协同酶解制备蛋清ACE抑制肽的方法

摘要

本发明公开了利用超高压协同酶解制备蛋清ACE抑制肽的方法。本发明为节约生产成本，提高酶解效率，通过利用超高压预处理方式降低加酶量并达到预期水解效果。本发明以蛋清粉为原料，经超高压预处理，探究100～500Mpa不同压力作用下，在30℃～45℃不同温度条件下处理5～20min后协同酶解法制备蛋清ACE抑制肽，再利用膜过滤技术将蛋清ACE抑制肽分成分子量不同的各个组分，经旋转蒸发及冷冻干燥成粉，通过液相色谱法进行活性测定，得到抑制活性较高的蛋清ACE抑制肽。同时本发明也为超高压预处理技术对鱼、虾等富含蛋白的动物资源的协同酶解制备活性肽提供参考。

主权项

1.利用超高压协同酶解制备蛋清ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)超高压处理：蛋清粉配成质量分数为8％的水溶液，需将蛋清粉溶液放置在真空袋中，并用真空包装机进行封口，高压处理装置由超高压主机系统、液压泵站系统、电器控制系统和温度控制系统组成，额定压力600MPa，有效容积0.6L(60mm×210mm)，温度控制范围‑10‑60℃，以水作为压力传递介质，高压容器内的温度由夹套循环水进行自动控温，将包装好的蛋清粉溶液置于100‑500Mpa压力下，在1‑2min后达到设定压力并在30‑45℃下保压5‑20min，处理结束后1‑2min卸压取出进行酶解；(2)蛋清肽酶解制备：用0.2mol/L氢氧化钠溶液调节蛋清溶液pH值至9，置于50℃的恒温水浴锅中，加入5％的Alcalase蛋白酶酶解，酶解3小时，酶解过程中需用搅拌器不断搅拌，并每隔半小时加入0.2mol/L的氢氧化钠溶液，使pH值维持在9±0.05，酶解完成后用旋转蒸发器进行浓缩并冻干成粉；(3)蛋清肽纯化：依次利用截留分子量为5KDa、3KDa和1KDa超滤膜对制备获得的蛋清肽粗品进行纯化，获得分子量小于1KDa蛋清肽组分，当小于1KDa蛋清肽浓度为10mg/mL时对ACE活性的抑制率为83％。