[发明专利]耐热性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其编码基因和应用有效
申请号: | 201810579016.0 | 申请日: | 2018-06-07 |
公开(公告)号: | CN110577939B | 公开(公告)日: | 2021-01-26 |
发明(设计)人: | 肖志壮;方安然;薛海曌;张稳 | 申请(专利权)人: | 青岛红樱桃生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12N15/53;A23K20/189;A23K50/80;A23K50/75;A23K50/30 |
代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 王晓晓 |
地址: | 266000 山东省青岛市高新区*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了耐热性提高的葡萄糖氧化酶突变体及其编码基因和应用,本发明采用定向进化技术对来源于黑曲霉的葡萄糖氧化酶进行蛋白质工程改造,具体使用易错PCR方法对葡萄糖氧化酶基因进行突变,再通过高通量筛选方法将正突变检出,得到热稳定性提高的突变体,相比野生型葡萄糖氧化酶GOD‑1,本发明得到的5个突变体GOD‑T‑1、GOD‑T‑2、GOD‑T‑3、GOD‑T‑4、GOD‑T‑5热稳定性得到了显著的提高,在70°C处理3min后,残余酶活分别提高了1.2、1.9、2.9、2.2和1.5倍。本发明提供的葡萄糖氧化酶突变体具有良好的市场应用前景和工业价值。 | ||
搜索关键词: | 耐热性 提高 葡萄糖 氧化酶 突变体 及其 编码 基因 应用 | ||
【主权项】:
1.耐热性提高的葡萄糖氧化酶突变体GOD-T-1,其特征在于:所述的葡萄糖氧化酶突变体GOD-T-1的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述的突变体GOD-T-1由氨基酸序列为SEQID NO:1的葡萄糖氧化酶的第112位的缬氨酸变为异亮氨酸获得。/n
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