[发明专利]一种酸枣仁皂苷B脂质体微乳的制备方法

摘要

本发明公开了一种酸枣仁皂苷B脂质体微乳的制备方法，该方法以酸枣仁为原料，原料经低级醇提取浓缩，提取后液油水分离；水液非极性大比表面积大孔树脂选择性吸附酸枣仁总皂苷，洗脱收集酸枣仁总皂苷；在酸枣仁总皂苷中加入β‑葡萄糖甙酶进行酶转化结构修饰，半合成酸枣仁皂苷B，提高总皂苷中酸枣仁皂苷B含量；所得转化产物经正相硅胶层析或反向柱层析得到高纯度酸枣仁皂苷B；取酸枣仁皂苷B、辅料卵磷脂、肉豆蔻酸异丙酯、正丙醇混合制成酸枣仁皂苷B脂质体微乳，本方法克服现有酸枣仁皂苷B提取分离技术收率低、纯度低等弊端；提高了酸枣仁皂苷B的得率，微乳制剂的使用更有利于人体充分吸收，提高生物利用度。

主权项

1.一种酸枣仁皂苷B脂质体微乳的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）以酸枣仁为原料，粉碎后采用质量浓度50‑70%的甲醇溶液或乙醇溶液热回流提取2‑3次，提取温度80‑85℃，每次提取时间1‑2h，过滤，合并提取液，减压浓缩回收有机溶剂，得酸枣仁提取物；（2）在步骤（1）酸枣仁提取物中加入其体积2‑3倍的水，得到提取物混悬液，再加入提取物混悬液质量5‑10%的氯化钠，加热搅拌溶解后，将溶液置于1‑3℃下静置24h，弃油层得到澄清水层液；（3）将步骤（3）中水层液经过大孔吸附树脂柱吸附酸枣仁总皂苷，上样流出液为盐类和杂质，水洗树脂柱到流出液为无色，然后用体积浓度70‑75%的乙醇溶液解析酸枣仁总皂苷，解析流速1‑1.5柱体积/小时，收集洗脱液，回收乙醇浓缩干燥得酸枣仁总皂苷；（4）将步骤（3）中酸枣仁总皂苷10‑12g、N‑乙酰葡萄糖胺10‑15g、β‑葡萄糖甙酶20‑50μg放入反应釜中，加纯水200mL，混匀后用冰乙酸调节pH值为5.5‑6；然后在氮气保护、50‑60℃下密闭反应6‑10h，进行酸枣仁皂苷B的半合成，反应结束后升高温度到100℃，灭酶10min，倒出反应液；（5）用步骤（4）反应液体积1‑2倍的正丁醇萃取反应液2‑3次，收集合并正丁醇层，旋蒸回收正丁醇，得酶转化反应产物；（6）采用200‑400目硅胶和氯仿湿法装柱，取步骤（5）中酶转化反应产物干法上样，采用氯仿‑甲醇‑水溶液洗脱，氯仿‑甲醇‑水溶液是氯仿:甲醇:水按体积比7‑5:1.2‑1:0.2‑0.1的比例混合制得，收集含酸枣仁皂苷B的洗脱液，浓缩回收有机溶剂，浓缩物用丙酮‑甲醇溶液结晶，干燥得酸枣仁皂苷B；（7）将步骤（6）酸枣仁皂苷B制备成质量浓度为15%‑25%的酸枣仁皂苷B水溶液，按以下质量比称取：酸枣仁皂苷水溶液10%‑15%、肉豆蔻酸异丙酯34‑38%、正丙醇22‑26%、卵磷脂27‑31%；先将卵磷脂用正丙醇溶解，再加入肉豆蔻酸异丙酯，搅拌均匀后，加入酸枣仁皂苷B水溶液，边滴加边搅拌，添加完后再搅拌1小时，制得酸枣仁皂苷B脂质体微乳。