[发明专利]一种病毒原液的制备方法有效
| 申请号： | 201810584021.0 | 申请日： | 2018-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN108841794B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | 汪涛 | 申请（专利权）人： | 苏州良辰生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 汪青;周敏 |
| 地址： | 215613 江苏省苏州市张家*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种病毒原液的制备方法，将宿主细胞采用无血清培养基进行清洗；将葡聚糖、磷酸盐缓冲液和病毒配制成混合液；将混合液加入到经处理后的宿主细胞中进行吸附感染；将经处理后的宿主细胞用含有胎牛血清的培养基培养；将经处理后的宿主细胞进行冻融使病毒释放，然后经离心得到病毒原液。本发明通过采用葡聚糖代替聚凝胺，由于葡聚糖本身是一种阳离子多聚合物，它与带负电荷的病毒结合后接近细胞膜而被摄取，而对细胞本身没有毒性作用，从根本上可以提高宿主细胞的生长率及增殖效率，对病毒的扩增起到明显的促进作用，从而使得制得的病毒原液的病毒滴度高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 病毒 原液 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种病毒原液的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）、将宿主细胞用无血清培养基进行清洗；（2）、将葡聚糖、磷酸盐缓冲液和病毒配制成混合液，其中，所述的混合液中葡聚糖的浓度为15~30μg/mL，所述的病毒的体积百分浓度为0.005%～0.1%；（3）、将步骤（2）制得的所述的混合液加入到经步骤（1）处理后的宿主细胞中进行吸附感染；（4）、将经步骤（3）处理后的宿主细胞用含有胎牛血清的培养基培养；（5）、将经步骤（4）处理后的宿主细胞进行冻融使病毒释放，然后经离心得到所述的病毒原液。
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