[发明专利]一种鉴定甜瓜种子纯度的多重PCR方法

摘要

本发明属于甜瓜栽培技术领域，具体涉及一种鉴定甜瓜种子纯度的三重PCR鉴定方法专利申请事宜。该方法用于杂交种纯度鉴定，具体包括：提取待检测材料DNA、进行三重PCR扩增、电泳检测并进行分析评价等步骤。本申请所提供的快速鉴定甜瓜种子纯度的三重PCR方法，不仅可在同一反应中同时鉴定多个位点，从而可以缩短工作时间，还可以成倍减少试剂耗材的消耗量。采用本发明所述的方法鉴定甜瓜种子纯度时，可有效克服传统单一PCR在种子纯度鉴定中速率慢的缺陷，具有时间短、特异性好、准确性高、低成本和广适用性等特点，能够简捷快速地获知甜瓜种子材料的纯度，以便于更有针对性地开展后续的种质资源分析和育种工作。

主权项

1.一种鉴定甜瓜种子纯度的三重PCR方法，其特征在于，该方法用于杂交种纯度鉴定，具体包括如下步骤：（1）提取待检测材料DNA提取待检材料的DNA；（2）进行三重PCR扩增PCR扩增时，具体引物序列设计要求为：依据引物进行扩增后，PCR扩增产物大小应具有多态性；同时PCR扩增产物大小应具有不小于50个的碱基差；PCR扩增时，同时采用3对引物或4对引物组合进行PCR扩增；（3）电泳检测并进行分析评价对步骤（2）中PCR扩增产物进行凝胶电泳检测，依据电泳图谱对种子纯度进行分析检测，纯度判断方法为：由于在设计扩增用引物时，PCR扩增产物具有多态性，因此待鉴定杂交种的父母本具有特定的有差异的条带，而据此父母本获得的杂交后代在进行PCR扩增时扩增产物也会带有父母本的组合条带，以此作为依据，如果待鉴定杂交后代中的扩增产物的条带组合与父母本组合条带结果不同，则待鉴定材料为假杂种，进而进行统计即可获得杂交种的纯度结果。