[发明专利]高通量测定血清中25-羟基维生素D的定量检测方法有效
| 申请号： | 201810602140.4 | 申请日： | 2018-06-12 |
| 公开（公告）号： | CN108732285B | 公开（公告）日： | 2021-05-28 |
| 发明（设计）人： | 高飞;海云;陈亮;栾羽;张志栋;黄新良;徐可丰;李冰;罗示齐;王万强;黄曙;刘礼欢;周响响;应海媚 | 申请（专利权）人： | 杭州度安医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/88 |
| 代理公司： | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人： | 张欢勇 |
| 地址： | 310026 浙江省杭州市余杭区五常街道向*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公布一高通量测定血清中25‑羟基维生素D的定量检测方法，包括以下步骤：待测样本的前处理：取样品加入含有25‑羟基维生素D同位素的内标物，涡旋震荡完成蛋白沉淀，加入特丁基甲醚涡旋震荡萃取，并离心得到上清液，氮气吹干所述上清液，并加入复溶液，涡旋震荡后离心得到待测样本；超高效液相色谱‑串联质谱检测所述待测样本，获得所述待测样本的内标峰以及对应内标峰面积；以及代入所述待测样本的峰面积与对应内标峰面积的比值到回归方程，得到待测样本的含量，其中所述回归方程反应标准品峰面积与对应内标峰面积比值和标准品溶液浓度之间的关系。 | ||
| 搜索关键词： | 通量 测定 血清 25 羟基 维生素 定量 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一高通量测定血清中25‑羟基维生素D的定量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1:待测样本的前处理：取血清样品加入含有25‑羟基维生素D同位素的内标物，涡旋震荡完成蛋白沉淀，加入特丁基甲醚涡旋震荡萃取，并离心得到第一上清液，向下层溶液再加入特丁基甲醚涡旋震荡萃取，并离心得到第二上清液，合并所述第一上清液和所述第二上清液得到上清液，氮气吹干所述上清液，并加入复溶液涡旋震荡后离心得到待测样本；S2:超高效液相色谱串联质谱完成检测所述待测样本，获得所述待测样本的峰面积和对应内标峰面积；以及S3:代入所述待测样本的峰面积与对应内标峰面积的比值到回归方程，得到所述待测样本的含量，其中所述回归方程反应标准品峰面积与对应内标峰面积比值和标准品溶液浓度之间的关系。
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