[发明专利]一种FerritinH、Bcl2及EGFP基因联合修饰的神经干细胞制备方法及应用在审
| 申请号： | 201810608064.8 | 申请日： | 2018-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN108795987A | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 沈君;张芳;毛家骥 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;A61K35/30;A61K49/00;A61K49/06;A61P9/10 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 单香杰 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种FerritinH、Bcl2及EGFP基因联合修饰的神经干细胞（NSCs）制备方法及应用。本发明构建的过表达慢病毒能安全有效地对NSCs进行三基因联合修饰，修饰后的干细胞过表达Bcl2，提升了移植后NSCs的抗凋亡及生存能力，增加有效存活干细胞数量，改善了脑梗死治疗的效果；通过FerritinH及EGFP报告基因成像，在活体水平实现对NSCs的磁共振及荧光成像双模态示踪，实现对移植后NSCs的实时、动态、无创、系统监测，为促进干细胞治疗临床转化提供实验依据，为深入阐明神经干细胞作用机制提供新的手段，在神经系统病变的干细胞替代治疗或转基因治疗方面均具有重要的科学意义和临床应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 修饰 神经干细胞 干细胞 制备 脑梗死 神经系统病变 移植 干细胞治疗 转基因治疗 基因联合 科学意义 临床应用 生存能力 替代治疗 系统监测 荧光成像 作用机制 磁共振 抗凋亡 慢病毒 双模态 有效地 构建 活体 示踪 无创 成像 应用 存活 联合 治疗 转化 安全 | ||
【主权项】：
1.一种基因工程化的可示踪神经干细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1. 合成融合基因FerritinH‑T2A‑Bcl2，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；S2. 将融合基因FerritinH‑T2A‑Bcl2插入含有EGFP基因的慢病毒表达载体，得到重组质粒；S3. 将重组质粒转染宿主细胞，制备FerritinH‑T2A‑Bcl2‑EGFP过表达慢病毒；S4. 将FerritinH‑T2A‑Bcl2‑EGFP过表达慢病毒转染神经干细胞，得到基因工程化的可示踪神经干细胞FerritinH‑Bcl2‑EGFP‑NSCs。
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