[发明专利]一种幼年大鼠视网膜色素上皮细胞分离培养方法在审
| 申请号： | 201810622406.1 | 申请日： | 2018-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN108998413A | 公开（公告）日： | 2018-12-14 |
| 发明（设计）人： | 娄慧;徐国旭;解来青;孙亮;荆剑 | 申请（专利权）人： | 苏州大学附属第二医院 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 215004 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种幼年大鼠视网膜色素上皮细胞分离培养方法；包括以下步骤:(1)取大鼠眼球用0.02mg/mL Dispase酶消化处理；(2)解剖眼球，去除角膜、晶体和脉络膜组织，分离视网膜，并剪成视网膜片，将视网膜片放入培养箱中孵育，孵育结束后，使视网膜片在培养皿内流动，促进视网膜上皮细胞片与视网膜片分离；(3)吸取分离后的视网膜上皮细胞片，在含PBS的培养皿中清洗；(4)清洗后的视网膜上皮细胞片转移到新的含PBS的培养皿中，加入胰酶消化、吹打，再种植于细胞培养皿中，置于37℃，5％CO2培养箱中培养。与现有技术相比，本发明方法具有无杂细胞污染，无需人为机械分离操作，过程简易，分离时间短的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 视网膜片 培养皿 视网膜上皮细胞 视网膜色素上皮细胞 分离培养 幼年大鼠 孵育 清洗 分离视网膜 脉络膜组织 细胞培养皿 大鼠眼球 机械分离 消化处理 胰酶消化 吹打 培养箱 杂细胞 放入 角膜 去除 眼球 解剖 简易 流动 污染 种植 | ||
【主权项】：
1.一种幼年大鼠视网膜色素上皮细胞分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取大鼠眼球用0.02mg/ml Dispase酶消化处理；(2)解剖眼球，去除角膜、晶体和脉络膜组织，分离视网膜，并剪成视网膜片，将视网膜片放入培养箱中孵育，孵育结束后，使视网膜片在培养皿内流动，促进视网膜上皮细胞片与视网膜片分离；(3)吸取分离后的视网膜上皮细胞片，在含PBS的培养皿中清洗；(4)清洗后的视网膜上皮细胞片转移到新的含PBS的培养皿中，加入胰酶消化、吹打，再种植于细胞培养皿中，置于培养箱中培养。
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