[发明专利]一种蛋白的非还原肽图分析方法有效
申请号: | 201810632993.2 | 申请日: | 2018-06-20 |
公开(公告)号: | CN110618229B | 公开(公告)日: | 2022-10-28 |
发明(设计)人: | 柯潇;唐懿挺;罗祖秀 | 申请(专利权)人: | 成都康弘生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N30/89 | 分类号: | G01N30/89 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 610036 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明提供一种蛋白的非还原肽图分析方法,该方法首先利用变性剂对蛋白进行变性处理,然后酶解,酸终止反应后通过反向高效液相色谱进行检测。本发明的非还原肽图分析方法使得蛋白在酶解时更彻底,反向高效液相色谱检测中色谱峰均匀分布,出峰数目多,分离度好,且色谱图基线平稳,能够最真实反应蛋白酶解后的各肽段情况,对蛋白的质量控制具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 蛋白 还原 分析 方法 | ||
【主权项】:
1.一种蛋白的非还原肽图分析方法,其特征在于,包括以下步骤:/n1)样品处理:将蛋白加入变性试剂进行变性后,加入胰蛋白酶进行酶解,然后酸终止酶解反应;/n2)反向高效液相色谱检测:对终止酶解后的样品进行反向高效液相色谱检测,检测条件为:/n色谱柱:反向十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;/n流动相A:0.1%三氟乙酸的水溶液;/n流动相B:0.07-0.1%三氟乙酸的含水乙腈溶液,其中水的含量为10-30%;/n柱温:30-60℃;/n检测波长:214nm;/n梯度洗脱。/n
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