[发明专利]一种基于二维MoS2纳米片和癌胚抗原适配体构建的荧光生物传感器及用于检测癌胚抗原

摘要

一种基于二维MoS2纳米片和癌胚抗原适配体构建的荧光生物传感器及在检测癌胚抗原中的应用，属于荧光生物传感器技术领域。该传感器是基于二种材料基础上构建的，一是具有高效荧光猝灭能力和对单链DNA、单链DNA与蛋白复合物具有良好生物识别功能的二维MoS2纳米片；二是具有特异性识别抗原、成本低、稳定性好、易于修饰等特点的癌胚抗原适配体。该生物传感器具有构建简单，快速检测，灵敏度高，特异性好，成本低廉，可重复性好等特点。本发明所构建的生物传感器在最佳优化条件下，对癌胚抗原的线性检测范围是100pg/mL～100ng/mL，检测下限为34pg/mL。该荧光生物传感器在多种肿瘤的筛选、诊断和预后评价方面有良好的应用前景。

主权项

1.一种基于二维MoS2纳米片和癌胚抗原适配体构建的荧光生物传感器，其特征在于：是由如下步骤制备得到，(1)设计癌胚抗原适配体探针5’‑Texas Red–ATACCAGCTTATTCAATT‑3’，送生物工程公司合成，得到适配体探针粉末；(2)将适配体探针粉末用蒸馏水溶解，得到5μM的适配体探针溶液；取离心管加入998μL、10mM Tris‑HCl缓冲液，将2μL、5μM适配体探针溶液加入到上述离心管中，震荡混匀；将癌胚抗原溶于10mM、Tris‑HCl缓冲液，得到已知浓度的癌胚抗原溶液；将该溶液加入到上述离心管中，癌胚抗原的终浓度为0.1～100ng/mL；然后用10mM、Tris‑HCl缓冲液补充体积至1400～1900μL，并在37℃水浴锅中孵育1～3小时；(3)将MoS2纳米片溶液加入到步骤(2)的溶液中，使离心管中溶液的体积为2mL，混匀后室温下反应5～20分钟；离心管中，MoS2纳米片的终浓度为100～300μg/mL，适配体探针的终浓度为5nM；(4)将步骤(3)得到的溶液加入到比色皿中，进行荧光光谱测定，然后根据测得的荧光强度与癌胚抗原浓度的数值关系拟合得到荧光强度－癌胚抗原浓度标准曲线；从而制备得到基于二维MoS2纳米片和癌胚抗原适配体构建的荧光生物传感器。