[发明专利]一种钠离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器

摘要

本发明提供一种钠离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器，包括：(1)切割体系，(2)sPCR扩增体系，(3)HCR体系，(4)包含ABTS显色液的检测体系。本发明通过巧妙地设计引物、模板及探针，使得在钠离子存在下可对模板进行超快扩增，扩增产物通过促发HCR反应，使得产物在适宜环境中形成G四链体。进一步利用G四链体的类过氧化物酶活性进行显色，解决了传统PCR产物难于可视化检测的难题，实现了对钠离子的快速、可视化检测。不仅如此，本发明提供的传感器对钠离子具有高特异、高灵敏的特点，检测结果更加客观、准确。

主权项

1.一种钠离子切割型通用隔断超快扩增可视化传感器，其特征在于，包括：(1)切割体系，(2)sPCR扩增体系，(3)HCR体系，(4)包含ABTS显色液的检测体系；所述检测体系用于对待测样品依次经由所述切割体系、sPCR扩增体系和HCR体系进行反应后所得产物进行显色检测；其中，所述切割体系包括底物链和酶链：底物链：5′‑CTCTATCTATrA‑GGAAGTACCGCCGC‑3′酶链：5′‑GCGGCGGTACCAGGTCAAAGGTGGGTGAGGGGACGCCAAGAGTCCCCGCGGTTAGATAGAG‑3′其中，rA表示核糖核酸；‑表示钠离子切割位点；所述sPCR扩增体系包括：正向隔断引物、反向引物、模板：正向隔断引物：5′‑AGACGAAGCACTGGTTGAAACTCC‑阻断物‑GGAGTTTCAACCAGTGCTTCGTCTTCATCGCACCGTCAAAGGAACC‑3′反向引物：5′‑GGAAGTACCGCCGCGGAGGGA‑3′模板：5′‑TCATCGCACCGTCAAAGGAACCTCAGTATCAGTGCTATACGTCGATCAGTAGCCCCGAATTTCGCCATCTTCCTCCCTCCGCGGCGGTACTTCC‑3′所述HCR体系包括2条探针：探针1：5′‑AGGGCGGGTGGGTGGAGTTTCAACCAGTGCTTCGTCTCCCCAGACGAAGCACTGGTTGATGGGT‑3′探针2：5′‑TGGGTAGACGAAGCACTGGTTGAAACTCCTCAACCAGTGCTTCGTCTGGGGTGGGTAGGGCGGG‑3′。