[发明专利]一种体外扩增肿瘤浸润淋巴细胞TIL的方法在审

专利信息
申请号: 201810639478.7 申请日: 2018-06-20
公开(公告)号: CN108753717A 公开(公告)日: 2018-11-06
发明(设计)人: 何英广;马思航 申请(专利权)人: 淮安诺康生物科技有限公司
主分类号: C12N5/0783 分类号: C12N5/0783
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 223005 江苏省淮安*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种体外扩增肿瘤浸润淋巴细胞TIL的方法,步骤为:步骤S1、TIL细胞分离:取癌旁组织剪碎浸入胶原酶溶液消化,过滤,PBS冲洗,收集滤液,离心,弃上清,加入PBS制成细胞悬液,用淋巴细胞分离液作不连续密度梯度离心,离心结束后收取下层界面的淋巴细胞,经PBS清洗后,按1×106/mL的浓度悬浮于含10%人AB型血清和IL‑2的培养基内培养,每3~5d换液一次;步骤S2、培养和扩增:当孔里的淋巴细胞生长至1×107时,将其转入含抗CD3单抗、抗CD28单抗和药物的培养瓶内孵育,24h后加入IL‑2连续培养,每隔2~3d半量更换含同等浓度IL‑2的新鲜培养基培养22~25d。
搜索关键词: 肿瘤浸润淋巴细胞 单抗 外扩 种体 淋巴细胞 不连续密度梯度离心 淋巴细胞分离液 淋巴细胞生长 胶原酶溶液 人AB型血清 新鲜培养基 浸入 连续培养 细胞悬液 培养基 培养瓶 孵育 换液 剪碎 扩增 下层 过滤 悬浮 转入 消化
【主权项】:
1.一种体外扩增肿瘤浸润淋巴细胞TIL的方法,其特征在于:正式培养前使用含有抗CD3单抗、抗CD28单抗和呋喃天竺葵酮A或呋喃天竺葵酮B的培养基孵育24h。
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