[发明专利]一种长期保存高虫草素蛹虫草菌种的方法

摘要

本发明公开了一种长期保存高虫草素蛹虫草菌种的方法，包括培养基的制备，且该培养基中含有青鲜素0.5～1份、龙舌兰提取物30～50份、羧甲基纤维素钠5～10份、三乙醇胺3～5份、水50～80份、PDA培养基400～500份；菌种培养；培养物脱水、菌种保存。本发明配制专用培养基用于蛹虫草菌种的培养、保存，培养基中的青鲜素、龙舌兰提取物配合使用可以抑制蛹虫草菌种的生长，从而延长其保存寿命，羧甲基纤维素钠能够很好的保水，使保存的蛹虫草菌种长期处于最佳状态，进一步延长了保存期。本发明操作简单、成本低，能够很好的保存蛹虫草菌种，经过本发明方法保存的蛹虫草菌种，保存期能达到4年以上，远远高于常规方法。

主权项

1.一种长期保存高虫草素蛹虫草菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，培养基的制备步骤1.1，按重量份称取以下各组分：青鲜素0.5～1份、龙舌兰提取物30～50份、羧甲基纤维素钠5～10份、三乙醇胺3～5份、水50～80份、PDA培养基400～500份；步骤1.2，将步骤1.1中称取的青鲜素溶于步骤1.1称取的三乙醇胺中，得到青鲜素的三乙醇胺溶液；步骤1.3，将步骤1.1中称取的羧甲基纤维素钠溶于步骤1.1称取的水中，得到水凝胶；步骤1.4，将步骤1.1中称取的龙舌兰提取物、PDA培养基、步骤1.2中青鲜素的三乙醇胺溶液以及步骤1.3中的水凝胶混合均匀，得到蛹虫草菌种培养基；将蛹虫草菌种培养基高温灭菌后趁热分装于试管内，凝固成蛹虫草菌种斜面培养基；步骤2，菌种培养在无菌条件下，将蛹虫草菌种接种到步骤1.4中得到的蛹虫草菌种斜面培养基上，先暗培养3～5d，然后光培养10～15d，培养结束得到蛹虫草菌种培养物；步骤3，培养物脱水在无菌条件下，将蛹虫草菌种培养物脱水至体积为原来的50～60％，得到脱水蛹虫草菌种培养物；步骤4，菌种保存往装有脱水蛹虫草菌种培养物的试管中注入灭菌好的石蜡油，使石蜡油淹没脱水蛹虫草菌种培养物1cm以上，再用灭菌好的石蜡封口后置于于4℃下保存。