[发明专利]一种反式茴香脑加氧酶突变体的高通量筛选方法及突变菌株和突变体有效
| 申请号： | 201810663244.6 | 申请日： | 2018-06-25 |
| 公开（公告）号： | CN108753912B | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 郑璞;刘思琴;王玉琴;陈鹏程;闻鹏 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/26 | 分类号： | C12Q1/26;C40B50/06;C12N9/02;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 王晓东 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种反式茴香脑加氧酶突变体的高通量筛选方法及突变菌株和突变体，包括以反式茴香脑加氧酶基因为模板，进行易错PCR，获得反式茴香脑加氧酶突变体文库；将所述反式茴香脑加氧酶反应底物添加入含有反式茴香脑加氧酶突变体的溶液中进行催化反应，将反应液与2,4‑二硝基苯肼进行显色反应，并加入碱溶液及有机溶剂反应，测定吸光度。本发明通过易错PCR构建突变库，并建立以2,4‑二硝基苯肼为显色剂，酶标仪测定OD |
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| 搜索关键词： | 一种 反式 茴香 脑加氧酶 突变体 通量 筛选 方法 突变 菌株 | ||
【主权项】：
1.一种反式茴香脑加氧酶突变体的高通量筛选方法，其特征在于：包括，以反式茴香脑加氧酶基因为模板，进行易错PCR，获得反式茴香脑加氧酶突变体文库；将所述反式茴香脑加氧酶的反应底物添加入含有反式茴香脑加氧酶突变体的溶液中进行催化反应，将反应液与2,4‑二硝基苯肼进行显色反应，并加入碱溶液及有机溶剂反应，测定吸光度。
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