[发明专利]一种微生物固定材料的制备方法

摘要

本发明公开了一种微生物固定材料的制备方法，属于微生物技术领域。本发明以海洋微紫青霉、简青霉为原料，添加葡萄糖等营养物质，在外加剪切力下相互缠绕形成菌丝球体，得到固定基体物，提高了固定微生物的生物活性，同时微生物附载于固定基体物中，使得微生物不易解体，延长了微生物的使用时间；以六水合氯化铁和氯化亚铁为原料，加入氢氧化钠，硅烷偶联剂、氨基六臂聚己二醇，形成稳定的酰胺键，提高了固定材料稳定性能，同时基于磁性物质可以回收利用，可以重复附载微生物，使用寿命延长。本发明解决了针对目前载体生物吸附性差、容易解体的问题。

主权项

1.一种微生物固定材料的制备方法，其特征在于，该制备方法包括如下步骤：（1）取海洋微紫青霉按质量比2~4：1~3：10~20加入简青霉、无菌水混合，振荡10~12h，得混合液，按质量份数计，取8~12份葡萄糖、1~4份酒石酸铵、2~5份磷酸二氢钾、0.3~0.7份五水合硫酸镁、2~5份酵母提取物混合，灭菌，得基体培养基，取混合液按4~6%的接种量接种至基体培养基中培养，离心，取沉淀冷冻干燥，得冷冻干燥物，备用；（2）取六水合氯化铁按质量比5~8：2~3：20~25加入氯化亚铁、去离子水搅拌混合，得混合物，取混合物按质量比2~4：10~13加入氢氧化钠溶液搅拌混合，过滤，取滤渣经去离子水洗涤，干燥，得干燥物；（3）取干燥物按质量比1~4：100~120加入质量分数为80%的乙醇混合，加入氨水，于45~55℃搅拌混合，再加入γ‑氨丙基三乙氧基硅烷搅拌混合，磁铁吸引，得磁性基体物，取磁性基体物按质量比1~3：90~120加入乙腈，超声，得超声物；（4）按质量份数计，取20~25份超声物、70~80份γ‑氨基丁酸、40~50份戊二醛、1~4份偶氮二异丁腈，于70~80℃搅拌混合，减压蒸馏，冷却至室温，磁铁吸引，取磁性物经水、无水乙醇依次洗涤，得洗涤物；（5）取洗涤物按质量比1：100~150加入水搅拌混合，再加入氨基六臂聚己二醇、步骤（1）备用的冷冻干燥物，超声分散，得超声分散液，取超声分散液按质量比4~7：1~3加入己基[3‑（二甲氨基）丙基]碳二亚胺盐酸盐搅拌混合，磁性分离，取固定磁性材料经去离子水洗涤，干燥，即得微生物固定材料。