[发明专利]一种用于检测烟草青枯病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法在审
| 申请号： | 201810709756.1 | 申请日： | 2018-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN108866214A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 潘月敏;鞠玉亮;周本国;沈鹏飞;许大凤;张丽娜 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 尹明明 |
| 地址： | 230036 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测烟草青枯病菌的RPA引物、探针、试剂盒及检测方法，属于生物安全技术领域；所述的RPA引物基于烟草青枯病菌Rip TALI‑9基因设计，RPA引物序列如SEQ ID No：1和2所示；所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，其序列大小为45bp‑54bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端的34bp处进行THF修饰。本发明还提供含有所述的RPA引物和探针的试剂盒。本发明进一步提供基于所述的RPA引物和探针建立的检测方法，以样品中提取的DNA为模板进行RPA扩增反应；本发明首次将RPA技术应用到烟草青枯病菌的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为烟草青枯病的诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。 | ||
| 搜索关键词： | 探针 引物 病菌 试剂盒 检测 烟草 修饰 烟草青枯病 病害防治 分子检测 基因设计 技术应用 扩增反应 区域设计 生物安全 特异性强 仪器设备 引物扩增 引物序列 灵敏度 减量 诊断 农药 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测烟草青枯病菌的RPA引物和RPA探针，其特征在于：所述的RPA引物基于烟草青枯病菌Rip TALI‑9基因设计，所述的RPA引物的上游引物如SEQ ID No：1所示，所述的RPA引物的下游引物如SEQ ID No：2所示；所述的PRA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，所述的RPA探针的序列大小为45bp‑54bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端的34bp处进行THF修饰。
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