[发明专利]一种合成甘露醇的基因工程菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201810727994.5 | 申请日： | 2018-07-05 |
| 公开（公告）号： | CN108795836A | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 李玉;赵雅童;石爱琴;王洪彬;秦惠民;刘逸寒;刘夫锋;路福平 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P7/18;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭晓迪 |
| 地址： | 300222 天*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供一种能够利用果糖合成甘露醇的大肠杆菌基因工程菌及其构建方法。利用Crispr/Cas9基因组编辑技术对大肠杆菌K‑12 MG1655的甘露醇磷酸转移酶基因及其IIA、IIB和IIC元件进行敲除，得到大肠杆菌突变体，并通过质粒pTrc99a整合来源于布氏乳杆菌的甘露醇脱氢酶基因，构建重组载体，并实现了其在大肠杆菌突变体中的高效表达，获得重组大肠杆菌，通过发酵技术诱导表达获得甘露醇。利用本发明方法构建的基因工程菌经发酵培养12h后，使用高效液相色谱进行检测，大肠杆菌具备生产甘露醇的能力，在常温下，甘露醇的产量可达30g/L‑40g/L，有利于甘露醇的工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 甘露醇 构建 大肠杆菌突变体 基因工程菌 合成甘露 大肠杆菌基因工程菌 甘露醇脱氢酶 高效液相色谱 重组大肠杆菌 大肠杆菌 布氏乳杆菌 甘露醇磷酸 转移酶基因 大肠杆菌K 发酵技术 发酵培养 高效表达 诱导表达 重组载体 常温下 基因组 果糖 敲除 整合 质粒 基因 检测 应用 生产 | ||
【主权项】：
1.一种合成甘露醇的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是以大肠杆菌K‑12MG1655为出发菌株，对其基因组上的甘露醇磷酸转移酶基因及其IIA、IIB和IIC元件进行基因敲除，得到大肠杆菌突变体，并通过质粒pTrc99a整合来源于布氏乳杆菌的甘露醇脱氢酶基因，构建重组载体，并实现了其在大肠杆菌突变体中的高效表达，获得重组大肠杆菌。
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