[发明专利]一种猪圆环病毒3型基因工程亚单位疫苗及其制备方法有效
| 申请号： | 201810743651.8 | 申请日： | 2018-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN108823231B | 公开（公告）日： | 2022-05-31 |
| 发明（设计）人： | 荣俊;匡红艳;李国攀 | 申请（专利权）人： | 荣俊 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/34;C12N1/21;C07K14/01;C07K19/00;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京金言诚信知识产权代理有限公司 11229 | 代理人： | 刘宝荣 |
| 地址： | 434025*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种猪圆环病毒3型(PCV3)基因工程亚单位疫苗及其制备方法，所述方法包括：S1构建PCV3cap蛋白基因克隆载体；S2对步骤S1克隆的PCV3cap蛋白基因进行剪接及表达筛选，并确定剪接方式；S3对步骤S2筛选的表达PCV3cap蛋白基因的密码子进行优化；S4在步骤S3优化的PCV3cap蛋白N端基因上游融合连接特定基因片段；S5用步骤S4重组的基因构建表达工程菌，采用所述表达工程菌表达可溶性PCV3cap蛋白，亚基分子量约为25kDa，并对其进行纯化；S6纯化后的蛋白在电子显微镜下呈现直径为17.74nm至18.20nm圆球状病毒样颗粒，利用纯化后的表达蛋白添加免疫增强剂配制疫苗。用该疫苗免疫实验猪后，能检测出抗PCV3Cap蛋白的抗体，在攻毒保护实验中能显著降低实验猪血清中的PCV3病毒载量，表明对实验猪有显著的保护作用。 | ||
| 搜索关键词： | 种猪 圆环 病毒 基因工程 单位 疫苗 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种猪圆环病毒3型(PCV3)基因工程亚单位疫苗的制备方法：S1：构建PCV3 cap蛋白基因克隆载体；S2：对步骤S1克隆的PCV3 cap蛋白基因进行剪接及表达筛选，并确定剪接方式；S3：对步骤S2筛选的能表达PCV3 cap蛋白基因的密码子进行优化；S4：在步骤S3优化的PCV3 cap蛋白N‑端序列的基因上游连接一段特定的基因片段；S5：用步骤S4重组的基因构建表达工程菌，采用所述表达工程菌表达制备可溶性PCV3 cap蛋白，亚基分子量约为25kDa，并对其进行纯化；S6：利用纯化后的PCV3 Cap蛋白添加免疫增强剂配置疫苗。
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