[发明专利]毛白杨叶中木犀草苷和槲皮素-3-o-β-吡喃葡萄糖苷的提取方法

摘要

一种毛白杨叶中木犀草苷和槲皮素‑3‑o‑β‑吡喃葡萄糖苷的提取方法，将毛白杨树叶粉碎后用乙醇溶液加热回流，进行多次回流提取后合并提取液；加入大孔吸附树脂并装入层析柱中，冲洗后吸附，然后经过多次洗脱后分别收集各洗脱溶液，减压浓缩干燥，合并40%总黄酮含量最高洗脱部位，得到一次分离物；在一次分离物中加入聚酰胺树脂后装入层析柱中，冲洗后吸附，然后经过多次洗脱后分别收集各洗脱溶液，减压浓缩干燥，20%含量最高部位15mg进一步纯化，制得二次分离物；二次分离物中加入ODS后装入层析柱中，冲洗后吸附，分别洗脱并收集洗脱液，减压浓缩干燥，得到木犀草苷和槲皮素‑3‑o‑β‑吡喃葡萄糖苷。

主权项

1.一种毛白杨叶中木犀草苷和槲皮素‑3‑o‑β‑吡喃葡萄糖苷的提取方法，其特征在于，包括：步骤S1、将毛白杨树叶粉碎，用浓度为50～90%的乙醇溶液，树叶与乙醇溶液的用量比为1g：3mL～12mL，然后加热至70℃后保持恒温，并进行回流提取，每次回流提取的时间为1～2.5h，进行1～4次回流提取后合并提取液，旋转蒸发干燥至每1mL浓缩液相当于原生药0.9～1.1g的流浸膏，蒸发温度为50℃，制得粗产物，并冷藏备用；步骤S2、D101大孔吸附树脂分离，按照粗产物：D101大孔吸附树脂1g:20mL装入层析柱中，用95%乙醇冲至液体清澈透明，再用蒸馏水冲至无醇味，缓慢滴加粗产物，滴加结束后关闭活塞吸附2小时，先用蒸馏水洗脱至无色，弃去洗脱液，依次加入20%、40%、95%乙醇溶液洗脱，每次洗脱至无色即可，流速为28mL/min，分别收集各洗脱溶液，减压浓缩干燥，合并40%总黄酮含量最高洗脱部位，得到一次分离物；步骤S3、取聚酰胺树脂，按照一次分离物：聚酰胺树脂1g:20ml混合均匀后装入层析柱中，用95%乙醇冲至液体不浑浊，再用蒸馏水冲至无醇味，缓慢滴加一次分离物，滴加结束后关闭活塞吸附2小时，先用蒸馏水洗脱至无色，洗脱液分离出来后备用，然后依次加入20%、40%、60%、80%、95%乙醇溶液洗脱并分离，每次洗脱至无色即可，洗脱流速为10mL/min，分离采用TLC方法以跟踪流分的分离情况，分别收集各洗脱溶液，减压浓缩干燥，20%含量最高部位15mg进一步纯化，制得二次分离物；步骤S4、按照二次分离物：ODS为1g:20mL的比例装入层析柱中，用甲醇冲洗后，再用蒸馏水冲三个柱体积，缓慢滴加二次分离物，滴加结束后关闭活塞吸附2小时，用20%的甲醇进行洗脱，流速为1mL/min，弃去第一个柱体积，收集第二和第三个柱体积的洗脱液，减压浓缩干燥，得到木犀草苷和槲皮素‑3‑o‑β‑吡喃葡萄糖苷葡萄糖苷。