[发明专利]一种利用EMS诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法

摘要

本发明属于芸豆育种技术领域，具体涉及一种利用EMS诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法。包括种子消毒处理、萌芽处理、诱变处理和田间种植，其中，萌芽处理步骤为：将无菌种子平铺放置在萌发基质内，并使萌发基质液面低于无菌种子上表面，使无菌种子萌发，待长出1～2个幼叶后，获得萌芽植物体；其中诱变处理步骤为：向每千克萌发基质添加EMS溶液，用EMS溶液诱变萌芽植物体，然后取出萌芽植物体，置于MS液体培养基中光周期培养5～7天，接着向每千克MS液体培养基中添加EMS溶液，用EMS继续诱变萌芽植物体，获得诱变处理植物体M0。本发明的方法为红芸豆专用高效诱变方法，提高诱变效率，减少EMS等致癌物的用量，减少对育种工作者的健康威胁。

主权项

1.一种利用EMS诱变产生芸豆或小扁豆突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，植物种子浸泡于水中6～12h，取出后进行消毒处理，得到无菌种子；所述植物种子为芸豆种子或者小扁豆种子；S2，萌芽处理将无菌种子平铺放置在萌发基质内，并使萌发基质液面低于无菌种子上表面，使无菌种子萌发，待长出1～2个幼叶后，获得萌芽植物体；所述萌发基质按照以下方法制备而成：将MS固体培养基、无菌水、改性秸秆粉按照3～4：1000：20～30的质量比例混和，并使MS固体培养基充分溶解；所述改性秸秆粉是将秸秆粉碎成秸秆段，然后浸泡于氯化钙溶液中，最后烘干并粉碎成粉末后得到的；S3，诱变处理向每千克萌发基质添加EMS溶液30～50ml，用EMS溶液诱变萌芽植物体，然后取出萌芽植物体，置于MS液体培养基中光周期培养5～7天，接着向每千克MS液体培养基中添加EMS溶液50～100ml，用EMS继续诱变萌芽植物体，获得诱变处理植物体M0；S4，田间种植(1)移栽诱变处理植物体M0至田间，筛选出性状发生突变的单株，收获M1代种子；(2)分别田间种植M1代种子和未经诱变的种子，田间观察植株性状，筛选出与未经诱变的种子性状不同的突变株，得M2代种子；(3)重复(2)的步骤，直至获得具有稳定突变性状的M6代植物种子，即筛选出性状稳定的芸豆或小扁豆突变体。