[发明专利]一种从临床血液标本中提取总DNA的方法

摘要

本发明公开了一种从临床血液标本中提取总DNA的方法，包括如下步骤：（1）在1.5ml离心管中加20μl ACD抗凝血，加入200μl TE震荡悬浮，充分混匀；（2）在上述处理好的200μl样品中加入300μl TBM溶液，充分混匀；再加入2μl Boiled RNase A，混匀，55℃保温10min；再加入20μl蛋白酶K，充分混匀，55℃保温3h；（3）加入300μl PB溶液，再加入300μlCHCl₃，充分混匀10min，然后12000rpm，室温离心10min；（4）用1ml Tip头将上清（约700ul）全部转移到套放于2ml Collection Tube的GenClean Column柱中，10000rpm，室温离心1min，本发明相比传统提取方法，从每个样本耗时8h改进至每个样本只需耗时1h，在纯度方面，从原有的1.70提升到了2.0，解决了采用传统方法提取DNA已经无法保证提取质量的问题。

主权项

1.一种从临床血液标本中提取总DNA的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）在1.5ml离心管中加20μl ACD抗凝血，加入200μl TE震荡悬浮，充分混匀；（2）在上述处理好的200μl样品中加入300μl TBM溶液，充分混匀；再加入2μl Boiled RNase A，混匀，55℃保温10min；再加入20μl蛋白酶 K，充分混匀，55℃保温3h；（3）加入300μl PB溶液，再加入300μlCHCl3，充分混匀10min，然后12000rpm，室温离心10min；（4）用1ml Tip头将上清（约700ul）全部转移到套放于2ml Collection Tube的GenClean Column柱中，10000rpm，室温离心1min；（5）取出GenClean柱，并倒掉Collection Tube中的废液，将GenClean柱重新放回Collection Tube中，加入600μl洗涤液，8000rpm，室温离心1min；（6）取出GenClean柱，并倒掉Collection Tube中的废液，将GenClean柱重新放回Collection Tube中，加入500μl洗涤液，8000rpm，室温离心1min；（7）取出GenClean柱，并倒掉Collection Tube中的废液，将GenClean柱重新放回Collection Tube中，12000rpm，室温离心2min，以除去残留的洗涤液，然后静置3min；（8）将GenClean柱放入新的已灭菌的1.5ml离心管中，在离心柱膜中央加入65μl洗脱液，室温放置3‑5min，12000rpm，室温离心1min，离心管内液体即为基因组DNA。