[发明专利]一种烟草中NNK和NNN的合相色谱串联质谱测定方法

摘要

本发明涉及一种烟草中4‑（甲基亚硝胺基）‑1‑（3‑吡啶基）‑1‑丁酮（NNK）和N‑亚硝基降烟碱（NNN）的合相色谱串联质谱的测定方法，属于烟草化学分析领域。本发明采用含0.5%醋酸的甲醇溶液对烟草样品中的NNK和NNN进行提取，提取液过滤后，使用UPC2‑MS/MS对提取液中NNK和NNN的浓度进行分析和定量。该方法的样品前处理过程简单、快速，便于批量严工的分析。且在以合相色谱串联质谱进行检测时，所用到的主要流动相为超临界流体CO2，助溶剂使用极少量的甲醇，具有环境友好的优点。本检测方法对NNK的检出限为0.05ng/mL，定量限为0.18ng/mL，对NNN的检出限为0.04ng/mL，定量限为0.12ng/mL。该方法灵敏度高，重复性好，适用于烟草样品中NNK和NNN的同时测定。

主权项

1.一种烟草中4‑（甲基亚硝胺基）‑1‑（3‑吡啶基）‑1‑丁酮（NNK）和N‑亚硝基降烟碱（NNN）的合相色谱串联质谱测定方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）称取1~2g烟末样品，加入100~200μL 1μg/mL的混合氘代内标NNK‑d4和NNN‑d4溶液，加入25~50mL含0.5%醋酸的甲醇溶液，超声提取后过滤，得到待测溶液；（2）取待测溶液进行超高效合相色谱串联质谱（UPC2‑MS/MS）分析，分析条件如下：色谱条件：采用ACQUITY UPC2TM CSHTM Fluoro Phenyl色谱柱，规格100mm×3.0mm, 1.7μm，柱温：10℃；进样量：2μL；流动相A：CO2，流动相B：甲醇；流速：1mL/min；背压：2000psi；补偿溶剂：含0.1%甲酸的甲醇溶液；流速：0.3mL/min；洗脱梯度如表1所示：表1. 洗脱梯度质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子模式，源温度：150°C；毛细管电压：4.5kV；去溶剂气温度：350℃；去溶剂气流速：800 L/h；反吹气流速：50L/h；多反应监测模式（MRM），详细参数见表2：表2. NNK和NNN及其氘代内标（NNK‑d4和NNN‑d4）的MRM参数注：*为定量离子；（3）采用内标标准曲线法定量计算样品中NNK和NNN的含量。