[发明专利]一种RT-RPA-侧流层析双重检测戊型肝炎病毒和甲型肝炎病毒的引物、探针及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于双重检测甲型肝炎病毒与戊型肝炎病毒的RT‑RPA‑侧流层析试剂盒，包括：应用于RT‑RAP扩增技术戊型肝炎病毒ORF2基因序列的上游引物、中间探针与下游引物和/或甲型肝炎病毒VP1基因序列的上游引物、中间探针与下游引物，重组酶聚合酶扩增技术所需常规试剂以及测流层析试纸条，所述测流层析试纸条包括加样垫、对照线、1号检测线和/或2号检测线，通过对照线、检测线与引物及探针标记的配合，使用该试剂盒能够快速、灵敏、特异地、在非实验室环境下也可以现场检测检测样本中戊型肝炎病毒ORF2基因和/或甲型肝炎病毒VP1基因。

主权项

1.一种RT‑RPA‑侧流层析双重检测戊型肝炎病毒和甲型肝炎病毒的引物对和探针组合，其特征在于，具体为检测戊型肝炎病毒ORF2基因和/或甲型肝炎病毒VP1基因的引物对和探针，其中戊型肝炎病毒ORF2基因的正向引物序列如SEQ ID No.1所示，反向引物序列如SEQ ID No.2所示，探针序列包含如SEQIDNo.3所示和SEQIDNo.4所示；甲型肝炎病毒VP1基因的正向引物序列如SEQIDNo.5所示，反向引物序列如SEQIDNo.6所示，探针序列如SEQIDNo.7所示和SEQIDNo.8所示；所述戊型肝炎病毒ORF2基因的探针，其SEQIDNo.3所示序列5’端连接有第一标记分子，SEQIDNo.4所示序列3’端连接有防止聚合反应的保护标签，SEQIDNo.3所示序列3’端和SEQIDNo.4所示序列5’端由能够被具有DNA损伤修复活性的酶识别并切除的人工碱基类似物连接；所述甲型肝炎病毒VP1基因的探针，其SEQIDNo.7所示序列5’端连接有第一标记分子，SEQIDNo.8所示序列3’端连接有防止聚合反应的保护标签，SEQIDNo.7所示序列3’端和SEQIDNo.8所示序列5’端由能够被具有DNA损伤修复活性的酶识别并切除的人工碱基类似物连接；所述戊型肝炎病毒ORF2基因的反向引物5’端连接有第二标记分子；所述甲型肝炎病毒VP1基因的反向引物5’端连接有第三标记分子；所述戊型肝炎病毒ORF2基因的探针和正向引物处于同一扩增方向；所述甲型肝炎病毒VP1基因的探针和正向引物处于同一扩增方向。