[发明专利]基于免疫磁珠标记细胞的分级筛选方法

摘要

本发明提出一种基于免疫磁珠标记细胞的分级筛选方法，包括若干级级联的细胞筛选装置，所述细胞筛选装置的主体结构被一层细胞筛分割成上层、下层腔体；通过硅胶管彼此连接,分级筛选方法包括如下步骤：S1.注入样本；S2.冲洗免疫磁珠；S3.施加磁场；S4.冲洗其他细胞；S5.收集目标细胞；重复步骤S2‑S5，直到筛选出所有的目标细胞，且目标细胞将在不同级的细胞筛中筛选出来。本发明使用物理方式实现细胞筛选，能够在同一个筛选装置中，通过多次分级筛选将多种目标细胞筛选出来，从而可以实现多种类型肿瘤细胞的同时诊断并提供准确的检测结果。

主权项

1.基于免疫磁珠标记细胞的分级筛选方法，其特征在于，包括若干级级联的细胞筛选装置，所述细胞筛选装置的主体结构被一层细胞筛分割成上层、下层腔体；通过硅胶管彼此连接,待检测样品中包含有N种目标细胞，N种目标细胞之间都携带与其他细胞所不同的特有的表面受体为x’，与表面受体x’配对的抗体为x，每级细胞筛选装置内充满了修饰有x抗体的单一免疫磁珠的悬浊液，其中N大于等于2；所述分级筛选方法包括如下步骤，S1.注入样本，将检测样品从进样口输入到第一级的细胞筛选装置的腔体内，关闭两侧阀门，使细胞与腔体内的免疫磁珠充分的结合；S2.冲洗免疫磁珠，待结合一定时间段后，对细胞筛选装置施加纵向水流，由于免疫磁珠尺寸远小于筛孔，免疫磁珠将会被冲入到下层腔体，与免疫磁珠结合的目标细胞和其他细胞由于尺寸远大于筛孔，将留在上层腔体；S3.施加磁场：在腔体周围加入纵向脉冲磁场，与免疫磁珠结合的目标细胞将吸附到细胞筛表面，其他细胞仍在上层腔体作自由运动；S4.冲洗其他细胞：打开与下一级腔体连接的阀门，从进样口通入横向水流，将在上层腔体的其他细胞冲入到下一级的上层腔体，其中充满着另外一种特异性极强的免疫磁珠悬浊液；S5.收集目标细胞：从下层腔体的下入口加入纵向水流，并撤掉纵向脉冲磁场，此时目标细胞将脱离细胞筛表面顺着水流反向向上运动，从上腔体的上出口收集到目标细胞；重复步骤S2‑S5，直到筛选出所有的目标细胞，且目标细胞将在不同级的细胞筛中筛选出来。