[发明专利]一种控制外源型添加物提高无核葡萄育种成功率的育种方法

摘要

本发明公开了一种控制外源型添加物提高无核葡萄育种成功率的育种方法，属于葡萄的选育领域，其步骤包括：(1)试管苗的获得，选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；(2)嫁接，将已经成熟的试管苗为接穗，砧木选择当地2‑3年生且长势强的野生葡萄品种，得到一号苗；(3)二次试管苗的获得，选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；(4)二次嫁接，将已经成熟的二次试管苗为接穗，砧木选择当地2‑3年生且长势强的野生葡萄品种，得到二号苗；(5)胚胎再挽救，以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，得到葡萄新品种后进行胚胎再挽救培育出新品种。本发明用于培育优质的葡萄品种。

主权项

1.一种控制外源型添加物提高无核葡萄育种成功率的育种方法，其特征在于，步骤如下：/n(1)试管苗的获得：/n选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；/n在当地的野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；/n到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；/n授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到目标种植地区进行胚胎挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；/n(2)嫁接：/n在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；/n(3)二次试管苗的获得：/n选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；/n在优质香妃父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；/n选择一号苗优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；/n授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到目标种植地区进行初次胚胎挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；/n(4)二次嫁接：/n在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；/n(5)胚胎再挽救：/n以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成熟，在种子最佳摘果期进行摘果，剪去果柄，自来水冲洗15-20分钟，然后在超净工作台上将冲洗过的幼果先利用乙醇溶液冲洗1次，用无菌水冲洗干净后再次放入次氯酸钠溶液中浸泡2-3分钟，取出后再用无菌水冲洗干净；/n(6)用消毒锅的解剖刀切开处理后的幼果，取出胚珠，科学合理的选择适合胚珠发育的外源物质进行培养基的配制，然后将胚珠接种到胚珠发育培养基中进行胚珠发育培养；/n(7)将胚珠培养60天后，在超净工作台上对胚珠进行剥胚处理，科学合理的选择适合萌发阶段胚的外源物质进行培养基的配制，然后将剥离出的胚接种到胚萌发培养基中，在光照条件下进行培养30-40天，即得试管苗，最后将试管苗放入自然光下进行炼苗即可。/n