[发明专利]一种适于荧光染色的草菇菌褶组织切片的制备方法在审

专利信息
申请号: 201810808763.7 申请日: 2018-07-20
公开(公告)号: CN109060472A 公开(公告)日: 2018-12-21
发明(设计)人: 万佳宁;鲍大鹏;杨瑞恒;周陈力;李正鹏;王莹;李燕;陈洪雨;吴莹莹;茅文俊 申请(专利权)人: 上海市农业科学院
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N1/30
代理公司: 上海泰能知识产权代理事务所 31233 代理人: 黄志达;魏峯
地址: 201106 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种适于荧光染色的草菇菌褶组织切片的制备方法,包括:固定;脱水;浸蜡;包埋;修蜡切片;展片烤片;脱蜡;染色。本发明步骤简单,成本低,使草菇菌褶细胞壁、细胞核等重要结构适于荧光染料染色并被清晰观察,从而为草菇遗传学研究提供真实有力的结构学证据,具有良好的应用前景。
搜索关键词: 草菇菌 荧光染色 组织切片 制备 细胞壁 荧光染料染色 细胞核 遗传学研究 重要结构 结构学 染色 包埋 草菇 浸蜡 烤片 切片 脱蜡 展片 脱水 清晰 证据 观察 应用
【主权项】:
1.一种适于荧光染色的草菇菌褶组织切片的制备方法,包括:(1)选取新鲜草菇菌褶组织作为切片的试验材料;将所选的试验材料切块,放入FAA固定液中于室温下固定;随后将经固定的试验材料脱水;(2)将经脱水的试验材料置于乙醇与低熔点多聚蜡的混合溶剂中,放置在烘箱中直到乙醇挥发完全;待乙醇挥发后,继续放置12~18h;(3)对包埋盒及经步骤(2)处理的试验材料进行预热,随后先在包埋盒中加入低熔点多聚蜡,再将试验材料夹入包埋盒中,室温下静置待低熔点多聚蜡完全凝固,将石蜡块取出,进行修蜡和切片;(4)将步骤(3)得到的切片进行展片,待切片均匀展开后,用涂有粘片剂的载玻片进行捞片;将附着有切片的载玻片进行烤片,随后放入无水乙醇中脱蜡;(5)向脱蜡后的载玻片滴加染色液进行染色,用PBS缓冲液冲洗,在载玻片中央滴入封片剂,用盖玻片封片,即可。
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