[发明专利]一种提高纳豆制品中B12含量的方法

摘要

一种提高纳豆中B₁₂含量的方法属于发酵工程领域，该方法包括以下步骤：(1)对纳豆菌株(Bacillus natto)进行常压室温等离子体诱变处理，筛选出一株高产B₁₂的纳豆菌株Q1；(2)挑选优质黄豆，清水冲洗去除杂质，在弱酸性条件下浸泡，至黄豆发胀无褶皱后，将浸泡好的黄豆沥水后放入高压蒸汽灭菌锅中于121℃下蒸煮25min。将蒸制好的黄豆冷却至室温，接种纳豆菌，接种后恒温培养，直至表面出现白膜且有拉丝为佳。将发酵好的纳豆放入冰箱中进行后熟，即得高产B₁₂的纳豆。本发明通过对纳豆菌株进行常压室温等离子体诱变处理，筛选出一株高产B₁₂的纳豆菌株Q1，进而发酵生产纳豆，显著提高纳豆中B₁₂的含量，丰富了纳豆的营养价值。

主权项

1.一种提高纳豆制品中B12含量的方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：(1)将PDA培养基上的纳豆菌(Bacillus natto)转接到液体培养基上(250mL锥形瓶中装100mL)，接种量为每100mL接种0.5cm×0.5cm大小的菌块6块，接种后静置20h，再置于30℃、180r/min，培养7d，获得菌丝体，将培养物8000r/min离心5min，去上清液；用无菌水冲洗两次后将菌丝体制备成细胞浓度为106‑107个/mL的菌悬液，将500mL的菌悬液和500mL 10％甘油混合，其中甘油用作突变处理中的保护剂，混合物中甘油的最终浓度为5％；取10μL混合后的菌悬液并均匀涂布在载玻片表面，置于ARTP诱变操作仪器的腔室中，然后将滑块和等离子体发射器喷射孔D之间的距离调节到2mm，恒定功率输出功率为120W，气体流速为10SLM，突变的处理时间为1‑3min；将处理过的载玻片转移到含有1mL无菌溶液的EP管中以形成菌悬液，各取100μL菌悬液以原液和10倍稀释液分别涂布于100μL一次性培养皿中，在25℃温育7天后，挑选长势、长速均优于出发菌株的再生菌株Q1；(2)挑选优质黄豆，清水冲洗2遍，以去除杂质，在水温25℃、水量3倍、时间20h、弱酸性条件下浸泡，至黄豆发胀无褶皱，将浸泡好的黄豆沥水后放入高压蒸汽灭菌锅中于121℃下蒸煮25min，将蒸制好的黄豆冷却至室温，接种2‑8％的纳豆菌Q1后搅拌均匀，在42℃的恒温培养箱中培养20h，直至表面出现白膜且有拉丝为佳；将发酵好的纳豆放入4℃冰箱中进行后熟24h，即得高产B12的纳豆。